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[求助] PCR中简并引物量的优化已有1人参与

我刚接触分子生物不久，没啥经验，最近在做一个PCR，已经把反应的退火温度，时间等条件确定下来了。老师给我的是一对简并引物（P1和P2），反应中的非特异性扩增条带主要由P2引起的，之前两个引物加入的量都是2.5ul(反应总体积是25ul)，现在我想设计一个正交试验将两个引物的加入量优化一下，请问我该如何设计，或者该往哪方面去想？我完全没有思路啊，请大家给我点建议，谢谢。

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加油，生命是一个长期积累的过程

1楼 2014-05-27 19:46:52

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cherish美丽: 金币+5, ★有帮助, 你是说这样将引物定量加入就行了，能减少非特异性扩增么？我的引物不知道浓度多少，能适用么？ 2014-05-27 21:18:48
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-27 22:57:49

我做的是引物稀释到2uM，然后体系中加入2ul就哦了，效果非常好，百试百灵