应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR小片段出不来
51/1返回列表
查看: 1519  |  回复: 7
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

[求助] PCR小片段出不来已有2人参与

最近新订两对了引物，做PCR，四百多的条带出来了，一百多的条带怎么也出不来，试过梯度的，也没出来，模版和四百多的是一样的，只不过P的片段不一样，理论上很好P的呀，所以纠结了，求指点，谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2014-05-10 18:28:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2014-05-10 21:21:03
可以尝试调节一下退火温度和延伸时间，另外配胶时可以增加琼脂糖浓度试一下。

嗯，温度调整过了，没用，其他试试吧，谢谢
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-10 21:22:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
泡菜肉丝(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-10 22:11:39
可以尝试调节一下退火温度和延伸时间，另外配胶时可以增加琼脂糖浓度试一下。
赞一下 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2014-05-10 21:21:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mehongyu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-01 16:55:36
确定引物序列的准确性了吗？照常理来说100多的不可能出不来，或者是不是胶浓度太低，片段和引物二聚体没有分开。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-13 16:06:07
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mehongyu at 2014-05-13 16:06:07
确定引物序列的准确性了吗？照常理来说100多的不可能出不来，或者是不是胶浓度太低，片段和引物二聚体没有分开。

嗯，序列没有问题，可是在100bp以下有淡淡的条带，应该是引物二聚体，1%的胶，胶浓度有很大影响吗？一点点都看不到。下次试下2%的看看吧。谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-13 16:46:45
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭