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去哪里看海

铁虫 (小有名气)

[求助] 用Kan把目的基因敲除了,该怎么把基因组上的Kan去除掉? 已有3人参与

为了敲除目的基因,所以用长引物法把目的基因替换了,替换为kan,那么现在我该怎么样把KAn去除掉??能否做到无痕呢??有该方面的文献的请告诉我,谢谢大家
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-05-06 22:15:58
Construction of Escherichia coli K-12 in-frame, single-gene knockout mutants: the Keio collection

请参考。。
做一个阳光、开朗的小和尚
2楼2014-05-06 21:29:36
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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One-step inactivation of chromosomal genes in Escherichia coli K-12 using PCR products.

PNAS 2000年的文章,这个也应该可以做参考一下
3楼2014-05-07 03:35:13
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inhahu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用pCP20质粒可以挪去kan,但会留下疤痕
4楼2014-05-09 12:48:00
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