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汕头大学海洋科学接受调剂
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我们飞哈

铜虫 (小有名气)

[求助] 同源重组敲除后的基因会回复吗? 已有1人参与

同源重组敲出了一株真菌的一个基因并赋予它某种抗性,这种抗性会在没有筛选压的情况下会自己消失吗?消失后所敲除的基因会不会恢复呢?有人知道吗
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朱多龙

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
我们飞哈(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-06 18:05:27
我想你还木有搞懂什么是同源重组啊!如果你用的是无痕敲除,那么敲除后的抗性基因整合到基因组上一般不会丢失,而敲除后的基因由于不在基因组上了,有怎么会出现呢?。
2楼2014-05-06 09:47:32
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我们飞哈

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-05-06 09:47:32
我想你还木有搞懂什么是同源重组啊!如果你用的是无痕敲除,那么敲除后的抗性基因整合到基因组上一般不会丢失,而敲除后的基因由于不在基因组上了,有怎么会出现呢?。

看一些文章上在同源重组敲除后都会做一个有丝分裂稳定性试验,就是在无抗性下养几代。一般结果都不是100%,会丢失
3楼2014-05-09 18:11:24
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倾听你的声音

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-05-06 09:47:32
我想你还木有搞懂什么是同源重组啊!如果你用的是无痕敲除,那么敲除后的抗性基因整合到基因组上一般不会丢失,而敲除后的基因由于不在基因组上了,有怎么会出现呢?。

我也遇到过这种问题,做无痕敲除,挑菌PCR验证确实敲除掉了,可是过了半个月还是原来的菌落PCR验证结果又回复了,原因不知
4楼2018-06-29 09:25:29
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