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gjq558

金虫 (小有名气)

[求助] 单头蚜虫DNA提取 已有3人参与

大家好,有做蚜虫相关实验的吗?我要对蚜虫进行单头DNA提取,用试剂盒做过几次,效果不理想,浓度很低,还有RNA污染,由于要进行大量提取,希望能有一种较快速有效的方法,向各位请教一下
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kellytan001

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-28 19:51:25
蚜虫较小,建议取15-20投提取。RNA污染的问题就是你试验进行中药注意了啊,避免干扰,用无RNA酶的水,呆手套,液氮研磨前要消毒等等。希望对你有所帮助。
奋斗无极限
2楼2014-04-28 11:08:54
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duanepp

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gjq558: 金币+5, 有帮助, 谢谢,你做过蚜虫吗? 2014-04-28 16:49:49
不知道你要DNA 做什么  一般单头都可以的  可以裂解的时间长一点 还有就是一定要去RNA酶
3楼2014-04-28 12:58:23
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rodickholm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以买QIAGEN的试剂盒,就是价格贵,但效果好
4楼2014-04-28 14:38:48
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gjq558

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kellytan001 at 2014-04-28 11:08:54
蚜虫较小,建议取15-20投提取。RNA污染的问题就是你试验进行中药注意了啊,避免干扰,用无RNA酶的水,呆手套,液氮研磨前要消毒等等。希望对你有所帮助。

谢谢,由于实验目的需要,必须要单头提取,所以比较费劲。
没有最好,只有更好
5楼2014-04-28 16:47:58
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gjq558

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by rodickholm at 2014-04-28 14:38:48
可以买QIAGEN的试剂盒,就是价格贵,但效果好

多谢,我也正准备多试几个试剂盒做做
没有最好,只有更好
6楼2014-04-28 16:50:37
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尹祥杰

木虫 (正式写手)

不会吧!新鲜的虫子吗?应该很好提吧!

[ 发自小木虫客户端 ]
众浪大化中,不喜也不惧。
7楼2014-04-28 17:19:22
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尹祥杰

木虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-28 19:52:02
捣碎,用15微升的STE裂解液,配方自己查,加0.5微升蛋白酶56度水浴三个小时,96度水浴十分钟,就可以了。

[ 发自小木虫客户端 ]
众浪大化中,不喜也不惧。
8楼2014-04-28 17:22:37
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gjq558

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 尹祥杰 at 2014-04-28 17:22:37
捣碎,用15微升的STE裂解液,配方自己查,加0.5微升蛋白酶56度水浴三个小时,96度水浴十分钟,就可以了。

嗯,和试剂盒的过程差不多
没有最好,只有更好
9楼2014-04-29 08:37:44
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gjq558

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 尹祥杰 at 2014-04-28 17:19:22
不会吧!新鲜的虫子吗?应该很好提吧!

DNA不难提,只是蚜虫较小,提取质量不高,要用负20放着的虫子
没有最好,只有更好
10楼2014-04-29 08:39:02
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