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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 单头蚜虫DNA提取
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gjq558

金虫 (小有名气)

[求助] 单头蚜虫DNA提取 已有3人参与

大家好，有做蚜虫相关实验的吗？我要对蚜虫进行单头DNA提取，用试剂盒做过几次，效果不理想，浓度很低，还有RNA污染，由于要进行大量提取，希望能有一种较快速有效的方法，向各位请教一下
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没有最好，只有更好
1楼 2014-04-28 10:44:14
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kellytan001

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-28 19:51:25
蚜虫较小，建议取15-20投提取。RNA污染的问题就是你试验进行中药注意了啊，避免干扰，用无RNA酶的水，呆手套，液氮研磨前要消毒等等。希望对你有所帮助。
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奋斗无极限
2楼2014-04-28 11:08:54
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duanepp

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gjq558: 金币+5, ★有帮助, 谢谢，你做过蚜虫吗？ 2014-04-28 16:49:49
不知道你要DNA 做什么  一般单头都可以的  可以裂解的时间长一点 还有就是一定要去RNA酶
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3楼2014-04-28 12:58:23
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rodickholm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以买QIAGEN的试剂盒，就是价格贵，但效果好
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4楼2014-04-28 14:38:48
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gjq558

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kellytan001 at 2014-04-28 11:08:54
蚜虫较小，建议取15-20投提取。RNA污染的问题就是你试验进行中药注意了啊，避免干扰，用无RNA酶的水，呆手套，液氮研磨前要消毒等等。希望对你有所帮助。

谢谢，由于实验目的需要，必须要单头提取，所以比较费劲。
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没有最好，只有更好
5楼2014-04-28 16:47:58
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gjq558

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by rodickholm at 2014-04-28 14:38:48
可以买QIAGEN的试剂盒，就是价格贵，但效果好

多谢，我也正准备多试几个试剂盒做做
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没有最好，只有更好
6楼2014-04-28 16:50:37
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尹祥杰

木虫 (正式写手)
不会吧！新鲜的虫子吗？应该很好提吧！

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众浪大化中，不喜也不惧。
7楼2014-04-28 17:19:22
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尹祥杰

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-28 19:52:02
捣碎，用15微升的STE裂解液，配方自己查，加0.5微升蛋白酶56度水浴三个小时，96度水浴十分钟，就可以了。

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众浪大化中，不喜也不惧。
8楼2014-04-28 17:22:37
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gjq558

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 尹祥杰 at 2014-04-28 17:22:37
捣碎，用15微升的STE裂解液，配方自己查，加0.5微升蛋白酶56度水浴三个小时，96度水浴十分钟，就可以了。

嗯，和试剂盒的过程差不多
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没有最好，只有更好
9楼2014-04-29 08:37:44
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gjq558

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 尹祥杰 at 2014-04-28 17:19:22
不会吧！新鲜的虫子吗？应该很好提吧！

DNA不难提，只是蚜虫较小，提取质量不高，要用负20放着的虫子
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没有最好，只有更好
10楼2014-04-29 08:39:02
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