24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 5577  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

guduyiyu

金虫 (正式写手)

[求助] pET-28a与pGEX-4T-1表达蛋白的区别 已有4人参与

大神们,最近在做原核表达载体构建,以及表达条件的筛选,用到了两种载体,pET-28a与pGEX-4T-1,蛋白是胞内蛋白,这两种载体有什么区别吗,哪一个作为表达载体更好一些?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

不努力永远不知道自己有多优秀
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuahan

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by guduyiyu at 2014-04-27 16:37:33
首先谢谢你啊,但是我现在用pET-28a作载体,导入宿主菌后,做外源表达时,也要经过IPTG的诱导啊,不诱导的话,蛋白表达水平特别的低,你所说的诱导是在表达外源蛋白时吗?还是别的什么...

你好,我也在做原核表达载体构建,想请教一下我现在知道目的基因的CDS序列,设计引物的时候应该是根据ORF设计吗?还有就是pET-22,28,30,32这几个表达载体应该怎么选择尼?你们做的时候是手头有哪个用哪个嘛?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-05-01 11:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+2 2014-04-24 21:26:57
类型和抗性不一样。pET-28a为组成型,抗kana,pGEX-4T-1为诱导型,抗Ampicillin。前者可以不经诱导组成型表达某个基因,后者在经过诱导物的诱导后才能表达某个基因;前者的优点就是不要诱导可以一直稳定的表达,这也决定了它的缺点,就是不能控制在何时表达某个基因,后者的优点就是可以控制表达的时间,但是需要诱导物。哪个更好的话,得看用途了。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
2楼2014-04-24 19:51:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guduyiyu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-04-24 19:51:04
类型和抗性不一样。pET-28a为组成型,抗kana,pGEX-4T-1为诱导型,抗Ampicillin。前者可以不经诱导组成型表达某个基因,后者在经过诱导物的诱导后才能表达某个基因;前者的优点就是不要诱导可以一直稳定的表达,这也 ...

首先谢谢你啊,但是我现在用pET-28a作载体,导入宿主菌后,做外源表达时,也要经过IPTG的诱导啊,不诱导的话,蛋白表达水平特别的低,你所说的诱导是在表达外源蛋白时吗?还是别的什么
不努力永远不知道自己有多优秀
3楼2014-04-27 16:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xavier1989

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

标签不同,GEX是用GST标签纯化,PET系列没记错是HIS。
我自己表达的情况来看,GST标签纯化的蛋白相对杂带少一点
5楼2014-05-01 12:27:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程调剂289 +38 yang婷 2026-04-07 41/2050 2026-04-09 21:51 by sophia_93
[考研] 293调剂 +22 yj1221 2026-04-08 23/1150 2026-04-09 21:15 by wutongshun
[考研] 266求调剂,一志愿哈工程电子信息,本科获多项国奖和省奖 +4 lumine1 2026-04-06 4/200 2026-04-09 17:38 by vgtyfty
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
[硕博家园] 有没有学校材料专业收跨调(一志愿085410) +5 momo(上岸版) 2026-04-06 8/400 2026-04-09 15:07 by only周
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
[考研] 求调剂,262机械专硕 +6 嗯yyl 2026-04-08 6/300 2026-04-09 12:01 by zhouyuwinner
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +6 我想上学!!6 2026-04-05 9/450 2026-04-08 17:45 by 宋小宝HQ
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 化学调剂 +18 艾志恒 2026-04-03 19/950 2026-04-07 16:00 by 起飞的比熊1
[考研] 一志愿北京化工085600 310分求调剂 +20 0856材料与化工3 2026-04-04 22/1100 2026-04-07 15:14 by 上岸快快
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 09:25 by 小黑不怕难
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358求调剂 +4 cs0106 2026-04-04 4/200 2026-04-05 18:46 by imissbao
[考研] 348求调剂 +6 wukira 2026-04-04 6/300 2026-04-05 18:11 by 猪会飞
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见