| 查看: 1914 | 回复: 4 | ||||
枫大帅木虫 (著名写手)
|
[求助]
水煮法提取幽门螺杆菌的DNA 已有1人参与
|
|
用水煮法提取幽门螺杆菌的DNA容易受哪些因素影响？为什么我提取的浓度比较低？ 如何提高DNA提取浓度？请各位兄弟姐妹们支个招，具体的操作步骤，越详细越好，跪谢大家了。。  |
回复此楼» 猜你喜欢
关于代码变化问题，想知道的进来
已经有14人回复
-
这样的filecode谁见过
已经有5人回复
-
国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率
已经有4人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
fileCode有新解读？
已经有16人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 用CTAB/蛋白酶K的方法提取DNA 求教几个问题 谢谢
已经有5人回复
- 微生物液氮冻融法DNA提取
已经有8人回复
- 提取幽门螺杆菌基因组DNA
已经有4人回复
- DNA各种提取方法及其原理
已经有5人回复
- 关于提取真菌DNA的方法
已经有9人回复
- 求助：幽门螺旋杆菌培养时pH是多少？最有效的培养方法是什么啊？（我是新手）
已经有5人回复
- 酚氯仿法提取DNA的原理
已经有29人回复
- 油菜DNA提取问题，用的CTAB法提取，要求质量高点
已经有3人回复
- 为何CTAB法提取的DNA总是断裂？
已经有40人回复
- 用ＣＴＡＢ法中含有的PVP提取叶子中的ＤＮＡ？
已经有3人回复
- CTAB法提取DNA
已经有19人回复
- 在用CTAB法提取曲霉总DNA时，提取很多次没有成功，期望大家多多帮助。
已经有16人回复
- 提取DNA所用的煮沸法的缺点都有哪些？
已经有6人回复
- 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法
已经有23人回复
- DNA的提取简介，包括法医DNA的提取方法！
已经有54人回复
- 微波法提取链霉菌DNA
已经有4人回复
- 【求助】石蜡组织标本中提取DNA方法
已经有4人回复
- 【求助】霉菌DNA提取方法
已经有3人回复
- 【求助/交流】高盐低PH法提取种子DNA的原理
已经有9人回复
- 【求助/交流】急！ 帮忙分析下CTAB法提取真菌DNA的电泳图
已经有4人回复
- 【求助/交流】细菌基因组DNA的提取法（CTAB/NaCl 法）,提取的DNA是否为细菌总DNA? 非�
已经有11人回复
- 【求助/交流】有没有人做过用水煮法提取DNA的啊，望赐教
已经有21人回复
xiaoamuchong
专家顾问 (职业作家)
科研工作者
-
专家经验: +261 - MicEPI: 3
- 应助: 309 (大学生)
- 金币: 7113
- 散金: 582
- 红花: 87
- 沙发: 8
- 帖子: 3151
- 在线: 745.7小时
- 虫号: 3130111
- 注册: 2014-04-12
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+3 2014-04-24 21:27:19
枫大帅: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-04-24 21:37:15
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+3 2014-04-24 21:27:19
枫大帅: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-04-24 21:37:15
|
水煮法：革兰氏阴性杆菌取过夜培养的菌液1.5mL加入到离心管中离心l1min，弃上清；沉淀加入0.6ml无菌去离子水，振i荡混匀，100℃水浴10min后离心，上清作为DNA模板-20℃保存备用。革兰氏阳性菌及革兰氏阴性球菌取过夜培养的菌液1.5mL加入到离心管中离心l1min，弃上清；沉淀加入800ul丙酮后混均，放入-20℃冰箱中冰浴10min，7500rpm/rnin离心5min．弃上清，沉淀在室温下放置5min．使丙酮蒸发干，再加入TE 100ul、10mg/ml溶菌酶100ul，37℃温育20min．离心，沉淀加人TE600ul重悬．再加入15mg／ml蛋白酶K25ul．55℃温育1h后煮10min，离心．上清作为DNA模板-20℃保存备用。 水煮法得到的DNA浓度比传统法要高，主要因为水煮法步骤简洁，减少了操作过程中对DNA的损失及外源DNA污染机会。水煮法提取过程中不需要酚一氯仿抽提及乙醇沉淀，避免了对人体的危害，且所需费用低，但水煮法提取的DNA纯度较传统法有小幅下降，主要是因为抽提过程简单，DNA溶液中含有蛋白质等杂质无法完全去除。水煮法适用于对DNA纯度要求不高的PcR、RAPD等实验。 |
2楼2014-04-24 19:26:51
xiaoamuchong
专家顾问 (职业作家)
科研工作者
-
专家经验: +261 - MicEPI: 3
- 应助: 309 (大学生)
- 金币: 7113
- 散金: 582
- 红花: 87
- 沙发: 8
- 帖子: 3151
- 在线: 745.7小时
- 虫号: 3130111
- 注册: 2014-04-12
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
枫大帅3楼2014-04-24 19:29:39
枫大帅
木虫 (著名写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 7727.2
- 散金: 3879
- 红花: 2
- 帖子: 2252
- 在线: 472.3小时
- 虫号: 1422836
- 注册: 2011-09-29
- 性别: GG
- 专业: 糖尿病
4楼2014-04-24 21:35:51
liaobuqi138
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 6
- 帖子: 19
- 在线: 11.7小时
- 虫号: 1932735
- 注册: 2012-08-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2015-01-19 14:26:44
100