24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1396  |  回复: 3
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看

321wangke321

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助】霉菌DNA提取方法

求霉菌DNA的提取方法,用尿素法提了好几次成功,急啊,求高人相助!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls2046

铁杆木虫 (职业作家)


我用的方法,简单,易操作,你试试看,可能会成功,,,,,,

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流。 2011-04-04 20:15:42
321wangke321(金币+10): 2011-04-05 10:30:23
silicare(EPI+1): 2011-05-12 12:12:00
(1) 收集霉菌孢子并稀释涂布于贴有玻璃纸的PDA培养基中,培养20 h后收集新鲜菌丝体
(2) 取0.5 g 菌丝体置于冰预冷的研钵中,加入0.1 g石英砂和2 mL冰预冷的CTAB抽提液,加入蛋白酶K至终浓度0.1 mg/mL,置冰上研磨成均匀浑浊液;
(3) 液体转入5 mL离心管并加入1/10体积的10% SDS,65℃温浴20~30 min后冷却至室温;
(4) 加入等体积Tris饱和酚-氯仿(1:1)抽提2次,上层水相转入新的离心管;
(5) 加入等体积氯仿抽提1次,上层水相转入新的离心管;
(6) 加入无DNase活性的RNase A至终浓度10 g/mL,37℃温浴30~60 min;
(7) 重复步骤5一次;
(8) 上层水相加入2倍体积无水乙醇,轻轻混匀;
(9) 用使用无菌移液器吸嘴轻轻挑出染色体DNA,在70%乙醇中洗涤一次,室温凉干残留乙醇;
(10) 加适量体积的TE溶液溶解,保存于4 ℃。
2楼2011-04-04 19:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

321wangke321

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by ls2046 at 2011-04-04 19:33:59:
(1) 收集霉菌孢子并稀释涂布于贴有玻璃纸的PDA培养基中,培养20 h后收集新鲜菌丝体
(2) 取0.5 g 菌丝体置于冰预冷的研钵中,加入0.1 g石英砂和2 mL冰预冷的CTAB抽提液,加入蛋白酶K至终浓度0.1 mg/mL,置冰上研磨 ...

谢谢,金币都给你。
3楼2011-04-05 10:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

645329775

新虫 (小有名气)


谢谢  很好
4楼2011-10-23 17:45:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 321wangke321 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +13 Eddieddd 2026-04-10 13/650 2026-04-10 23:27 by 314126402
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +8 叶zilin 2026-04-10 8/400 2026-04-10 23:26 by 314126402
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-10 6/300 2026-04-10 21:13 by chemisry
[考研] 298求调剂 +8 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 10/500 2026-04-10 11:25 by 高维春
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考研] 一志愿2110,化学学硕310分,本科重点双非求调剂 +18 努力奋斗112 2026-04-08 18/900 2026-04-09 23:28 by wolf97
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 322求调剂,08工科 +3 今天是个小号 2026-04-08 3/150 2026-04-09 15:53 by wp06
[考研] 求助071001调剂!!! +7 黄守松 2026-04-05 8/400 2026-04-09 09:07 by 徐良白眉大侠
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 328求调剂 +4 ghhh88888 2026-04-06 5/250 2026-04-07 14:45 by ghhh88888
[考研] 材料与化工363求推荐 +11 zh096 2026-04-04 11/550 2026-04-06 19:14 by guanxin1001
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 考研调剂 +3 mcbbc 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:03 by barlinike
[考研] 一志愿沪9,求生物学调剂,326分 +6 刘墨墨 2026-04-04 6/300 2026-04-04 19:44 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见