应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 大量提取链霉菌DNA
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 1410  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

他她0328

银虫 (小有名气)

[求助] 大量提取链霉菌DNA

我要建库，克隆链霉菌内一段基因，但是现在大提DNA出现问题了，DNA提不出来，中间用苯酚抽提时的蛋白不是成层状的，而是跟霉菌似的毛状的，所以上清较难吸出来。只要出现这种情况就提不出DNA，所以请教大家一下这是什么造成的，是菌的问题吗？
跪求解答！

[ Last edited by silicare on 2014-2-18 at 15:14 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-31 20:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用枪打散。应该可以提出来。
赞一下 回复此楼
2楼2011-09-01 12:16:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 他她0328 at 2011-08-31 20:03:17:
我要建库，克隆链霉菌内一段基因，但是现在大提DNA出现问题了，DNA提不出来，中间用苯酚抽提时的蛋白不是成层状的，而是跟霉菌似的毛状的，所以上清较难吸出来。只要出现这种情况就提不出DNA，所以请教大家一下这 ...

离心时间长一点试试吧
赞一下 回复此楼
3楼2011-09-01 18:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

他她0328

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wlsky24 at 2011-09-01 12:16:34:
用枪打散。应该可以提出来。

用枪打散菌丝体么？
赞一下 回复此楼
4楼2011-09-01 19:45:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-03 07:48:38
蛋白应该直接分层的啊。贴ep管壁取上清即可。絮状蛋白好像没有碰到过。多离心看看
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-09-01 20:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weekend883

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

他她0328(金币+1): 2011-09-04 09:00:05
蛋白酶多消化一会就好了
赞一下 回复此楼
6楼2011-09-02 10:00:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

他她0328

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wlsky24 at 2011-09-01 20:58:02:
蛋白应该直接分层的啊。贴ep管壁取上清即可。絮状蛋白好像没有碰到过。多离心看看

小提时分层很明显，但是大提用50ml离心管做的时候就出现絮状蛋白了，上清很难吸出来。。。我把转速增大到12000rpm，效果还是不明显。。。跪求帮助
赞一下 回复此楼
7楼2011-09-02 12:47:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

他她0328

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by weekend883 at 2011-09-02 10:00:11:
蛋白酶多消化一会就好了

蛋白酶作用了两个小时，出现絮状蛋白是蛋白酶解不充分的原因么？
赞一下 回复此楼
8楼2011-09-02 12:48:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-03 07:48:48
哦。我没有做过50ml,提取的。我都是小提的，而且没有用蛋白酶，只是用了溶菌酶。一般都可以提出来。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-09-02 16:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weekend883

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 他她0328 at 2011-09-02 12:48:42:
蛋白酶作用了两个小时，出现絮状蛋白是蛋白酶解不充分的原因么？

我以前遇到过，多消化下就好了，体系放大点，多加点蛋白酶，多加点缓冲液，把你的过程贴出来，大家帮你分析下呗
赞一下 回复此楼
10楼2011-09-02 17:40:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 他她0328 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物医药调剂｜SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 材料工程专业日语生求调剂 +9 111623 2026-04-07 9/450 2026-04-07 23:31 by 一只好果子?
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +4 我想上学！！6 2026-04-05 7/350 2026-04-07 22:10 by Delta2012
[考研] 363求调剂 +9 zh096 2026-04-04 9/450 2026-04-07 21:51 by 418490947
[考研] 305求调剂 +4 77Qi 2026-04-06 4/200 2026-04-07 20:06 by shanqishi
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
[考研] 考研调剂 +7 15615482637 2026-04-04 7/350 2026-04-06 22:56 by chenzhimin
[考研] 化学调剂求助 +8 LULONG1 2026-04-03 8/400 2026-04-06 10:26 by dongzh2009
[考研] 生物与医药086000调剂一志愿西北农林320分 +3 美美女士 2026-04-03 3/150 2026-04-05 21:55 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 考研生物学考A区211，初试322，科目生化和生物综合，求调剂 +6 。。。54 2026-04-03 6/300 2026-04-05 14:54 by JOKER0401
[考研] 一志愿郑大0705求调剂 +3 橘十一 2026-04-02 4/200 2026-04-05 00:05 by chongya
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-04 20:37 by 蓝云思雨
[考研] 278求调剂 +3 依旧！ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 20:27 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +3 ffyyu 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:03 by 蓝云思雨
[考研] 303求调剂 +3 一色清羽 2026-04-02 4/200 2026-04-03 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 282求调剂 +13 呼吸都是减肥 2026-04-01 13/650 2026-04-02 14:10 by baoball
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭