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微波法提取链霉菌DNA
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
wlsky24(金币+2): 非常感谢，麻烦问下有没有什么要特别注意的事项？ 2011-09-04 13:07:05
wolfebst(金币+5, MicEPI+1): 鼓励 2011-09-04 15:52:16
wlsky24(金币+2): 非常感谢，麻烦问下有没有什么要特别注意的事项？ 2011-09-04 13:07:05
wolfebst(金币+5, MicEPI+1): 鼓励 2011-09-04 15:52:16
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1.刮取适量生长良好的纯化菌落于eppendorf管中，加入洗涤液lmL，振荡混匀; 2.离心收集菌丝; 3.加入35μL裂解液，振荡混匀，于功率为600W微波炉中处理60s; 4.加入400μL65℃预热的抽提液，振荡混匀;加入等体积的苯酚/氯仿抽提，离心收集上清; 5.加入异丙醇沉淀，70%乙醇洗涤，室温干燥，加入适量TE溶解。 洗涤液:50mmol/LTris，pH8.0，25mmol/L EDAT，0.1%PVP。 裂解液:50mmol/LTris，pH8.0，25mmol/L EDAT，3%SDS，1.2%PVP。 抽提液:10mmol/LTris，pH8.0，l mmol/L EDAT，0.3mol/LNaAC，1.21%PVP。 |
2楼2011-09-04 09:55:17
3楼2011-09-04 13:37:42
4楼2011-09-04 14:42:54
5楼2011-09-04 15:07:37
