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瓶儿花

金虫 (小有名气)

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应助: 0 (幼儿园)
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专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wlsky24(金币+2): 非常感谢，麻烦问下有没有什么要特别注意的事项？ 2011-09-04 13:07:05
wolfebst(金币+5, MicEPI+1): 鼓励 2011-09-04 15:52:16

1.刮取适量生长良好的纯化菌落于eppendorf管中，加入洗涤液lmL，振荡混匀;
2.离心收集菌丝;
3.加入35μL裂解液，振荡混匀，于功率为600W微波炉中处理60s;
4.加入400μL65℃预热的抽提液，振荡混匀;加入等体积的苯酚/氯仿抽提，离心收集上清;
5.加入异丙醇沉淀，70%乙醇洗涤，室温干燥，加入适量TE溶解。
洗涤液:50mmol/LTris，pH8.0，25mmol/L EDAT，0.1%PVP。
裂解液:50mmol/LTris，pH8.0，25mmol/L EDAT，3%SDS，1.2%PVP。
抽提液:10mmol/LTris，pH8.0，l mmol/L EDAT，0.3mol/LNaAC，1.21%PVP。

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2楼2011-09-04 09:55:17

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