24小时热门版块排行榜    

查看: 1240  |  回复: 4
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)

[求助] 微波法提取链霉菌DNA

哪位有微波法提取链霉菌DNA的具体方法步骤哦,能否共享下,不甚感激
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瓶儿花

金虫 (小有名气)

试剂和离心管以及移液枪的枪头都要灭过菌后才能使用,微波炉中加热时间不能过长,且功率不宜过大。乙醇洗涤后要尽量将乙醇挥发干,但也不能时间放置过长,不然DNA将不能溶解到TE中。抽提收集上清时要尽量不要将苯酚氯仿抽提上来,不然会影响你后续的一些试验的。比如说酶切等。。。。
3楼2011-09-04 13:37:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wlsky24(金币+2): 非常感谢,麻烦问下有没有什么要特别注意的事项? 2011-09-04 13:07:05
wolfebst(金币+5, MicEPI+1): 鼓励 2011-09-04 15:52:16
1.刮取适量生长良好的纯化菌落于eppendorf管中,加入洗涤液lmL,振荡混匀;
2.离心收集菌丝;
3.加入35μL裂解液,振荡混匀,于功率为600W微波炉中处理60s;
4.加入400μL65℃预热的抽提液,振荡混匀;加入等体积的苯酚/氯仿抽提,离心收集上清;
5.加入异丙醇沉淀,70%乙醇洗涤,室温干燥,加入适量TE溶解。
洗涤液:50mmol/LTris,pH8.0,25mmol/L EDAT,0.1%PVP。
裂解液:50mmol/LTris,pH8.0,25mmol/L EDAT,3%SDS,1.2%PVP。
抽提液:10mmol/LTris,pH8.0,l mmol/L EDAT,0.3mol/LNaAC,1.21%PVP。
2楼2011-09-04 09:55:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-09-04 13:37:42:
试剂和离心管以及移液枪的枪头都要灭过菌后才能使用,微波炉中加热时间不能过长,且功率不宜过大。乙醇洗涤后要尽量将乙醇挥发干,但也不能时间放置过长,不然DNA将不能溶解到TE中。抽提收集上清时要尽量不要将苯 ...

thanks.能否留个邮箱,方便请教?
4楼2011-09-04 14:42:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瓶儿花

金虫 (小有名气)

5楼2011-09-04 15:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见