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fenheyue银虫 (小有名气)
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DNA不溶解怎么办？ 已有9人参与
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| 各位大侠好，半个月前我收到国外寄过来的DNA样品，是用乙酸钠和乙醇沉淀的。我离心后放在通风厨里晾干了2个小时，然后用dd水溶解，可是都融了半个月了，还有很多DNA没有溶解，我该怎么办呢？？？我曾试过53°加热促进溶解，但是基本上没有效果。 |
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 分子生物学技术 |
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【答案】应助回帖
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吃过藕粉没？ 或者你试过把agarose粉末加到热水，或者已经煮化的胶里面么？ 这种agarose，哪怕你煮上七七四十九天，也不见得溶解 这就是为什么过干的核酸不利于溶解的一个类似现象 核酸作为多聚物，你让它干透了，再加水，外面的一层溶解了，但是作为多聚物，又离不开那一团，不离开，里面的又接触不到水，何谈溶解？ agarose粉末直接到热水，外面的一层很快溶解糊化，形成一层防水层，里面的再也接触不到水了 而在冷水里面，水还有时间渗透到颗粒里面的，这样就可以都溶解了。 所以你这个情况提高盐浓度估计难以奏效。 我建议你加点碱试试，把NaOH的终浓度加到8 mM，8 mM的NaOH pH~9，不影响DNA的稳定性。溶解之后也很容易用Tris或者HEPES buffer调回来。 碱性环境有利于DNA溶解，相当于提高了溶解度。 另外，很有效的一个方法，物理破坏，你用枪头去戳那段沉淀，尽量把它搞小，增加接触面积。 |
18楼2014-04-25 18:08:36
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