应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA不溶解怎么办？
192/2返回列表上一页12
查看: 9700  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fenheyue

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-24 11:48:43
你那个是基因组DNA吗？

是的啊，有什么好办法么
赞一下 回复此楼
做一个有主见的人！
11楼2014-04-24 20:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
11楼: Originally posted by fenheyue at 2014-04-24 20:02:19
是的啊，有什么好办法么...

1M NaCl,1x TE,溶解一周，试试

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
12楼2014-04-24 20:24:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fenheyue

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-24 20:24:28
1M NaCl,1x TE,溶解一周，试试
...

我昨天试了2M NaCl 都不溶。。。TE也试过了，也是不溶。。。我准备放弃了
赞一下 回复此楼
做一个有主见的人！
13楼2014-04-24 20:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨日的晴天
14楼2014-04-24 20:48:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
常规TE缓冲液试试，可50-60度助融
赞一下 回复此楼
只有不断地失败才会成功
15楼2014-04-24 21:49:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mage123

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以前买过一次絮状的DNA，也是超难溶的，每次只能取一点点，然后用玻璃棒边碾边溶，基本上就能溶了。之后再买的时候就买粉末状的了，基本上搅一搅就溶了。加油
赞一下 回复此楼
16楼2014-04-24 22:24:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by fenheyue at 2014-04-24 20:44:04
我昨天试了2M NaCl 都不溶。。。TE也试过了，也是不溶。。。我准备放弃了...

实在不行，试试用DNA提取buffer

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
17楼2014-04-24 22:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

吃过藕粉没？
或者你试过把agarose粉末加到热水，或者已经煮化的胶里面么？
这种agarose，哪怕你煮上七七四十九天，也不见得溶解
这就是为什么过干的核酸不利于溶解的一个类似现象
核酸作为多聚物，你让它干透了，再加水，外面的一层溶解了，但是作为多聚物，又离不开那一团，不离开，里面的又接触不到水，何谈溶解？
agarose粉末直接到热水，外面的一层很快溶解糊化，形成一层防水层，里面的再也接触不到水了
而在冷水里面，水还有时间渗透到颗粒里面的，这样就可以都溶解了。

所以你这个情况提高盐浓度估计难以奏效。

我建议你加点碱试试，把NaOH的终浓度加到8 mM，8 mM的NaOH pH~9，不影响DNA的稳定性。溶解之后也很容易用Tris或者HEPES buffer调回来。
碱性环境有利于DNA溶解，相当于提高了溶解度。

另外，很有效的一个方法，物理破坏，你用枪头去戳那段沉淀，尽量把它搞小，增加接触面积。
赞一下(2人) 回复此楼
18楼2014-04-25 18:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fenheyue

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by hutil1543 at 2014-04-24 11:04:00
一般是两个问题，一个就是你说的overdry，吹太干就没办法了，再弄也不会完全溶。不过会有一部分溶，你要做PCR是没问题的。
另一个可能是抽提不太彻底，记得苯酚氯仿抽提的时候多摇一摇。

谢谢！
回复此楼
做一个有主见的人！
19楼2014-04-26 09:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fenheyue 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +6 羊腰板 2026-08-21 6/300 2026-08-21 21:03 by 雪城001
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 12/600 2026-08-21 19:46 by kulium
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭