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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA不溶解怎么办？
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fenheyue

银虫 (小有名气)

[求助] DNA不溶解怎么办？ 已有9人参与

各位大侠好，半个月前我收到国外寄过来的DNA样品，是用乙酸钠和乙醇沉淀的。我离心后放在通风厨里晾干了2个小时，然后用dd水溶解，可是都融了半个月了，还有很多DNA没有溶解，我该怎么办呢？？？我曾试过53°加热促进溶解，但是基本上没有效果。
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做一个有主见的人！
1楼 2014-04-22 15:44:19
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hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fenheyue(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-24 17:48:36
一般是两个问题，一个就是你说的overdry，吹太干就没办法了，再弄也不会完全溶。不过会有一部分溶，你要做PCR是没问题的。
另一个可能是抽提不太彻底，记得苯酚氯仿抽提的时候多摇一摇。
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fenheyue
8楼2014-04-24 11:04:00
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盛身绽放

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fenheyue(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-23 12:05:48
你的buffer是pH 7.0的？
大分子量的DNA肯定溶解的慢甚至不溶
一般pH 8左右的buffer溶DNA比较好                  
不知道是不是你的缓冲液有问题，用水，trs-hcl缓冲液，都是可以溶解的 ，放在四度冰箱里，过夜。就可以了。 如果你的还没有溶，就多放几天吧。 1mg/ml，浓度没有问题的。
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活的漂亮是本事
2楼2014-04-22 20:04:11
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fenheyue

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 盛身绽放 at 2014-04-22 20:04:11
你的buffer是pH 7.0的？
大分子量的DNA肯定溶解的慢甚至不溶
一般pH 8左右的buffer溶DNA比较好                  
不知道是不是你的缓冲液有问题，用水，trs-hcl缓冲液，都是可以溶解的 ，放在四度冰箱里，过夜 ...

我是直接用dd水溶的。我在网上搜了一下说是overdry了，不知道有没有什么办法啊？
我今天配了2mol/L的NaCl加进去了也没有效果。。。。
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做一个有主见的人！
3楼2014-04-22 20:33:14
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xygcdmr

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fenheyue(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-23 12:05:56
一般就是用dd水或者是TE溶解，不太理解半个月都溶解不了。如果样品太多，可以多加水或者是TE，溶解后再浓缩下。
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4楼2014-04-23 00:40:23
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