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fenheyue

银虫 (小有名气)

[求助] DNA不溶解怎么办? 已有9人参与

各位大侠好,半个月前我收到国外寄过来的DNA样品,是用乙酸钠和乙醇沉淀的。我离心后放在通风厨里晾干了2个小时,然后用dd水溶解,可是都融了半个月了,还有很多DNA没有溶解,我该怎么办呢???我曾试过53°加热促进溶解,但是基本上没有效果。
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盛身绽放

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 盛身绽放 at 2014-04-22 20:04:11
你的buffer是pH 7.0的?
大分子量的DNA肯定溶解的慢甚至不溶
一般pH 8左右的buffer溶DNA比较好                  
不知道是不是你的缓冲液有问题,用水,trs-hcl缓冲液,都是可以溶解的 ,放在四度冰箱里,过夜 ...

最后的可能就是DNA的纯度有问题

[ 发自小木虫客户端 ]
活的漂亮是本事
7楼2014-04-23 15:54:31
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盛身绽放

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fenheyue(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-23 12:05:48
你的buffer是pH 7.0的?
大分子量的DNA肯定溶解的慢甚至不溶
一般pH 8左右的buffer溶DNA比较好                  
不知道是不是你的缓冲液有问题,用水,trs-hcl缓冲液,都是可以溶解的 ,放在四度冰箱里,过夜。就可以了。 如果你的还没有溶,就多放几天吧。 1mg/ml,浓度没有问题的。
活的漂亮是本事
2楼2014-04-22 20:04:11
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fenheyue

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 盛身绽放 at 2014-04-22 20:04:11
你的buffer是pH 7.0的?
大分子量的DNA肯定溶解的慢甚至不溶
一般pH 8左右的buffer溶DNA比较好                  
不知道是不是你的缓冲液有问题,用水,trs-hcl缓冲液,都是可以溶解的 ,放在四度冰箱里,过夜 ...

我是直接用dd水溶的。我在网上搜了一下说是overdry了,不知道有没有什么办法啊?
我今天配了2mol/L的NaCl加进去了也没有效果。。。。
做一个有主见的人!
3楼2014-04-22 20:33:14
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xygcdmr

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fenheyue(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-23 12:05:56
一般就是用dd水或者是TE溶解,不太理解半个月都溶解不了。如果样品太多,可以多加水或者是TE,溶解后再浓缩下。
4楼2014-04-23 00:40:23
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