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颖颖贝

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于GFP的问题

最近在实验室帮师姐做实验，发现最近转入带GFP的基因之后，发现转入之后本应出现的表形却没有出现，于是我就想到了一个问题。

GFP一般与目标基因一起转入植株中，最后形成融合蛋白，这样就能在激光的照射下很清楚地看到目标基因的表达位置。
但是，GFP与目标基因转录出来的蛋白形成融合蛋白后，会不会因此改变了目标基因转录出来的蛋白结果，或者影响蛋白的功能呢？
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1楼 2014-04-15 23:03:56
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
★ ★ ★
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-04-16 08:54:33
我知道的有把GFP连在N端，还有连在C端，然后看是不是一样的结果。一般来说，蛋白定位的序列在N端，所以做两个，然后比较就能排除你考虑的问题。
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7楼2014-04-16 00:03:10
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
不会的，如果会，它早就被淘汰了

[ 发自小木虫客户端 ]
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10楼2014-04-16 06:13:03
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)
★
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
blessing
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11楼2014-04-16 07:27:55
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tiaotiaohu0

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主直到怎么把GFP连接到E.coli吗？或者知道哪里有卖这种连接好的吗？
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12楼2014-04-16 10:47:13
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zhangxiaotuo

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有可能会的，2楼说得很对
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13楼2014-04-18 21:56:10
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by pennchem at 2014-04-16 00:03:10
我知道的有把GFP连在N端，还有连在C端，然后看是不是一样的结果。一般来说，蛋白定位的序列在N端，所以做两个，然后比较就能排除你考虑的问题。

嗯，这样应该可以了，或者可以把没有连GFP的载体和连了GFP的载体一起转进去，那样应该也行。
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14楼2014-04-18 22:55:33
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junnavme2014

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种可能性是非常大的，因为蛋白在翻译出来以后都是需要折叠的，和GFP融合以后折叠的构像对不对是个问题，需要检测
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15楼2014-05-07 21:21:42
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meng_xu

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
GFP应该不会影响你目标蛋白的活性和其他的，如果要是，现在早没有人用了。
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16楼2014-05-08 02:04:43
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chentao2楼
2014-04-15 23:17   回复  
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
ljqpyk3楼
2014-04-15 23:25   回复  
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
kiss200855374楼
2014-04-15 23:32   回复  
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
yahuhaha5楼
2014-04-15 23:37   回复  
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
kingki6楼
2014-04-15 23:58   回复  
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
雪人哥哥8楼
2014-04-16 00:25   回复  
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Nescafe20149楼
2014-04-16 00:29   回复  
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中庸00117楼
2014-08-30 22:15   回复  
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