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颖颖贝

铜虫 (小有名气)


[交流] 关于GFP的问题

最近在实验室帮师姐做实验,发现最近转入带GFP的基因之后,发现转入之后本应出现的表形却没有出现,于是我就想到了一个问题。

GFP一般与目标基因一起转入植株中,最后形成融合蛋白,这样就能在激光的照射下很清楚地看到目标基因的表达位置。
但是,GFP与目标基因转录出来的蛋白形成融合蛋白后,会不会因此改变了目标基因转录出来的蛋白结果,或者影响蛋白的功能呢?
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★ ★ ★
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-04-16 08:54:33
我知道的有把GFP连在N端,还有连在C端,然后看是不是一样的结果。一般来说,蛋白定位的序列在N端,所以做两个,然后比较就能排除你考虑的问题。
7楼2014-04-16 00:03:10
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Neo2000

木虫 (著名写手)


★
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
不会的,如果会,它早就被淘汰了

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2014-04-16 06:13:03
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)


★
颖颖贝(金币+1): 谢谢参与
blessing
11楼2014-04-16 07:27:55
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tiaotiaohu0

铜虫 (正式写手)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主直到怎么把GFP连接到E.coli吗?或者知道哪里有卖这种连接好的吗?
12楼2014-04-16 10:47:13
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zhangxiaotuo

新虫 (初入文坛)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有可能会的,2楼说得很对
13楼2014-04-18 21:56:10
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by pennchem at 2014-04-16 00:03:10
我知道的有把GFP连在N端,还有连在C端,然后看是不是一样的结果。一般来说,蛋白定位的序列在N端,所以做两个,然后比较就能排除你考虑的问题。

嗯,这样应该可以了,或者可以把没有连GFP的载体和连了GFP的载体一起转进去,那样应该也行。
14楼2014-04-18 22:55:33
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junnavme2014

金虫 (正式写手)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种可能性是非常大的,因为蛋白在翻译出来以后都是需要折叠的,和GFP融合以后折叠的构像对不对是个问题,需要检测
15楼2014-05-07 21:21:42
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meng_xu

铜虫 (小有名气)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
GFP应该不会影响你目标蛋白的活性和其他的,如果要是,现在早没有人用了。
16楼2014-05-08 02:04:43
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简单回复
chentao2楼
2014-04-15 23:17   回复  
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ljqpyk3楼
2014-04-15 23:25   回复  
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2014-04-15 23:32   回复  
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yahuhaha5楼
2014-04-15 23:37   回复  
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kingki6楼
2014-04-15 23:58   回复  
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2014-04-16 00:25   回复  
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2014-04-16 00:29   回复  
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中庸00117楼
2014-08-30 22:15   回复  
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