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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于Ad5腺病毒的包装问题（穿梭质粒pXC1（经自己改建后带GFP）和骨架质粒pBHGE3i）
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川星流月

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于Ad5腺病毒的包装问题（穿梭质粒pXC1（经自己改建后带GFP）和骨架质粒pBHGE3i） 已有2人参与

各位老师大家好，我是明年要毕业的研究生，先在做Ad5腺病毒的包装，之后还准备用包装好的腺病毒做细胞实验。但是现在实验被咔在包装这一部分了。我用的包装质量是pXC1（经自己改建后带GFP）和pBHGE3i，看文献别人包装是直接将两质粒转293细胞，我也是这么做的，但是十天以后感觉荧光量好像还减弱了，细胞没有明显的CPE现象。收集原液，再次感染293cell并无荧光出现，也没有细胞病变效应，此时感觉病毒的包装荧光是失败了。现在不知道该怎么办，问了几家做腺病毒包装的公司都不做这两个质粒的包装，眼看毕业在即，病毒都包装不好，下面的实验就更没法做了。所以急需赶紧找到包装的方法，请求各位做过这两个质粒包装的老师们给些知道和建议，能够帮助我解决这个燃眉之急，小女感激不尽！
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1楼 2013-12-29 22:36:48
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川星流月

新虫 (初入文坛)
大侠们勇于回复啊~~
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2楼2013-12-30 12:51:17
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Jianxiao_H

金虫 (正式写手)
帮不上忙 只能帮顶了
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多少辛酸不可告人。
3楼2014-01-03 15:44:08
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川星流月

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Jianxiao_H at 2014-01-03 15:44:08
帮不上忙 只能帮顶了

谢谢~~
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4楼2014-01-06 13:38:20
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hgq115

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我以前也做过这课题，转染是否成功跟细胞状态关系很大，跟你用来转染的质粒纯度和转染试剂也有很大关系，具体问题就要看实验情况了
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5楼2014-01-07 09:56:46
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doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们也做过你的这类课题，首先293细胞的代数一定要低，我们后来买了低代数的细胞，第二细胞状态一定要好，然后是耐心，有时候有的病毒要20多天才出毒，中间可换液体
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6楼2014-01-08 09:09:31
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