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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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WSXP1104

新虫 (小有名气)

[求助] DNA提取后电泳,无条带 已有7人参与

微生物基因组大概20-23KB。1%琼脂糖凝胶电泳,100v,30min。Marker有条带,样品、空白、阴性对照都没有条带。
初学者,求指点。
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
WSXP1104: 金币+1 2014-04-16 09:19:43
你用什么方法提的?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-15 20:37:31
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
WSXP1104(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-16 19:31:55
会不会胶浓度大了,换0.6%的胶跑一次看看,我之前也是,跑1%胶没跑出来,换了0.6%的胶就跑出来了。。。
Someone
3楼2014-04-15 21:29:16
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WSXP1104

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-15 20:37:31
你用什么方法提的?

试剂盒,提取肉中微生物的基因组
4楼2014-04-15 23:20:22
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by WSXP1104 at 2014-04-15 23:20:22
试剂盒,提取肉中微生物的基因组...

你那是不是量太少了看不到

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-04-16 06:09:03
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WSXP1104

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-16 06:09:03
你那是不是量太少了看不到
...

Goldview核酸染料,说明书上说可以检测到50ng级DNA或RNA片段。
胶浓度没有问题?
6楼2014-04-16 08:14:39
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by WSXP1104 at 2014-04-16 08:14:39
Goldview核酸染料,说明书上说可以检测到50ng级DNA或RNA片段。
胶浓度没有问题?...

你是分离了微生物提的还是直接连肉一起提?

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-04-16 08:21:21
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WSXP1104

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-16 08:21:21
你是分离了微生物提的还是直接连肉一起提?
...

无菌操作称取10.0g碎肉样(其余留作备份,-80℃保存)于盛有90mL生理盐水的锥形瓶中,摇床振摇15min(280rpm,4℃)。取30mL于一灭菌离心管中,300×g(4℃)离心5min。取10mL上清于另一灭菌离心管中,12000×g(4℃)离心10min. 尽可能吸弃上清,离心所得沉淀,采用EasyPure® Genomic DNA Kit试剂盒提取。
8楼2014-04-16 08:36:36
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by WSXP1104 at 2014-04-16 08:36:36
无菌操作称取10.0g碎肉样(其余留作备份,-80℃保存)于盛有90mL生理盐水的锥形瓶中,摇床振摇15min(280rpm,4℃)。取30mL于一灭菌离心管中,300×g(4℃)离心5min。取10mL上清于另一灭菌离心管中,12000×g(4℃ ...

那肯定看不到嘛,直接PCR算了,量太少太少

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-04-16 08:39:10
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匿名

用户注销 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
WSXP1104(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-16 19:32:11
本帖仅楼主可见
10楼2014-04-16 08:43:49
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