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安小安4302

铁虫 (正式写手)

[求助] pET系列的质粒怎么提???已有10人参与

最近在提质粒,用生工试剂盒,但是pET这个载体提出的量很少,怎么办??增加了菌量还是不行,同时提的pUCm-T就很好。求大家给点意见!!!
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
安小安4302: 金币+2, 有帮助, 就是用的碱裂解呀,要命了 2014-04-14 21:06:07
用分子克隆上的碱裂解法抽提的效果还是挺好的
4楼2014-04-14 20:56:01
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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安小安4302: 金币+2, 有帮助, 在amp在板子上挑的菌呀,也是含amp的液体培养基做的呀 2014-04-14 21:04:25
是不是菌株出问题了,空载体提的也是这个结果吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-14 20:47:10
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for5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
安小安4302: 金币+2, 谢谢 2014-04-14 21:03:18
看下质粒是松弛型的还是严整型的,有必要的话可以用10ml菌去提
操蛋的XX
3楼2014-04-14 20:48:47
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安小安4302

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangpeng227 at 2014-04-14 20:56:01
用分子克隆上的碱裂解法抽提的效果还是挺好的

就是用的碱裂解呀,用生工试剂盒,两份3ml的菌,16小时摇菌,加到一个吸附柱,还是量很低。不知道该怎么办了
不要因为走的太远,以至于忘记了为什么出发!
5楼2014-04-14 21:02:53
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