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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 建立一个新的测酶活方法，底物是不溶于水的，这个方法对吗？
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五水合硫酸铜

金虫 (初入文坛)

[求助] 建立一个新的测酶活方法，底物是不溶于水的，这个方法对吗？ 已有2人参与

DERA（2-脱氧-D-核糖-5-磷酸醛缩酶）可以催化其天然底物乙醛和D-甘油醛-3-磷酸可逆的醛缩反应形成D-2-脱氧-5-磷酸，但是由于底物昂贵，希望能用另一个底物A和乙醛进行缩合反应代替天然底物测酶活，可是现在发现底物A在水系是不溶的，于是在PBS中加入了DMSO（有的用吐温80）助溶，此时底物A实质上是分散在PBS中的，并没有完全溶解，但反应是可以正常在进行的，不知道这样测酶活的方法对不对？
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1楼 2014-04-12 22:35:52
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Dearstar

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
五水合硫酸铜: 金币+5, ★有帮助 2014-12-15 11:04:08
如果你有产物的标准样品，用产物的生成来计算酶活，然后你能确定你反应结束的时候，仍然是有充分的A悬浮在溶液中，这一方法就是可行的，如果你要依靠底物的消耗量来计算酶活的话，这是不可靠的。我以前也做过不怎么溶的，发现这么测得的底物消耗和产物生成相差甚远啊。。
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3楼2014-09-16 09:56:34
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欧阳隐飞

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

底物在DMSO的水溶液中应该有一定的溶解度的
我觉得应该确认底物的最低溶解浓度
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2楼2014-05-11 17:10:26
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口青小小

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Dearstar at 2014-09-16 09:56:34
如果你有产物的标准样品，用产物的生成来计算酶活，然后你能确定你反应结束的时候，仍然是有充分的A悬浮在溶液中，这一方法就是可行的，如果你要依靠底物的消耗量来计算酶活的话，这是不可靠的。我以前也做过不怎么 ...

为什么反应结束时要有充分的A悬浮就可行呢？如果这样不是说明底物反应不好吗
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不论走多远，都不要忘记为什么出发。
4楼2018-05-15 18:02:42
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