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yxh710

金虫 (小有名气)

[求助] 制备液相分离纯化样品溶解问题已有5人参与

一个全保护的多肽,含有20个氨基酸,显碱性,疏水性的片段,不溶于乙腈,甲醇,水,溶于DMF,醋酸,但是加一定比例的乙腈/水很容易析出,取2mg的样品用200ul的醋酸溶解后用200ul的50%乙腈/水稀释后上制备液相,流动相为0.1%TFA的水和乙腈,从10%-90%全梯度洗脱,在3min就出来一个大峰,后面就什么都没有了,按理说我这个样品极性比较小,为什么刚开始就冲出来了,是不是根本就没有挂在柱子上,现在就是不知道应该怎么溶解样品,把它分离纯化出来。求解
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七喜丸子

金虫 (小有名气)

一枚苦逼的搬砖民工

【答案】应助回帖

有专门分离多肽的柱子,孔径会大一点。你调到ph为10试试呢,不过得找个能耐受的柱子。一般都是2-9的范围,安捷伦extend的柱子范围比较广

[ 发自小木虫客户端 ]
Keelahse'lai
11楼2014-04-15 02:27:14
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