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| 请问有没有人做原核的5’RACE,能不能给推荐个试剂盒? |
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4楼2014-03-30 12:40:14
neuralcrest
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3楼2014-03-30 10:40:42
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biostar2009
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wendyzx: 金币+2, ★★★很有帮助, 很有帮助 2014-03-30 14:57:51
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5’RACE的原理有很多,一般而言,可以分为以下几种: α,最古老的5‘RACE,使用末端转移酶在cDNA第一链的末端加T tract。 β,依赖于cap结构的,采用只有烟草酸焦磷酸酶才能让cap脱磷,使用linker特异性的连接mRNA的5’端,这种策略较第一种有较大改进。 γ,依赖于MMLV末端非模板扩征能力,进行链转移的。 对于原核系统,严谨度最高的β方案用不上,α方案假阳性太多现在基本上已经淘汰 Clonetech有一款用γ方案的kit,叫做SMART……可以考虑 或者选用类似方案的其他kit |
6楼2014-03-30 13:40:19













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