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| 请问有没有人做原核的5’RACE，能不能给推荐个试剂盒？ |
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5’RACE的原理有很多，一般而言，可以分为以下几种： α，最古老的5‘RACE，使用末端转移酶在cDNA第一链的末端加T tract。 β，依赖于cap结构的，采用只有烟草酸焦磷酸酶才能让cap脱磷，使用linker特异性的连接mRNA的5’端，这种策略较第一种有较大改进。 γ，依赖于MMLV末端非模板扩征能力，进行链转移的。 对于原核系统，严谨度最高的β方案用不上，α方案假阳性太多现在基本上已经淘汰 Clonetech有一款用γ方案的kit，叫做SMART……可以考虑 或者选用类似方案的其他kit |
6楼2014-03-30 13:40:19
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