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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » PCR扩增产毒基因但目的条带弱，是不是表明该菌不含此产毒基因呢？？？
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简佳爱学

新虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增产毒基因但目的条带弱，是不是表明该菌不含此产毒基因呢？？？ 已有1人参与

各位虫友，我最近在做产毒真菌的一些相关基因的扩增，观察菌株是否含有此基因，在PCR时遇到一些问题
    退火温度为52℃，扩增时目的条带（600bp）很微弱，并且其上下都有微弱杂带，我提高退火温度到55℃后，目的条带依然微弱，杂带少一些，再提高至58℃时，就不出现任何条带了；我问了一些老师，有的认为我的这些扩增出来条带微弱的菌株可能自身本来就不含有该基因，但是，我认为既然在该位置有模糊的条带，是不是首先能确认基因存在，只是在PCR方法上需要改进呢？
    请大家给我一些建议，非常感谢！
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1楼 2014-03-18 19:58:05
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-03-19 21:48:38
你扩增出来应该先去测个序，然后再下定论
赞一下 回复此楼
2楼2014-03-19 10:12:25
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