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求助测P450酶活!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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| 求助:我用ECOD法测p450酶活,加入如底物7-乙氧基香豆素,测反应产物7羟基香豆素荧光值,但是反应完后和对照比没有变化,动力学也没变化。是什么原因呢?用的是1ml 0.1Mph7.6的磷酸缓冲液、1mMDTT、1mMPMSF、1mMPTU破碎组织提取初酶液,200ul初酶液加入10ul 10mM 7-EC,10ul 10mM NADPH 30度反应30分钟。 |
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