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[交流]
关于酶的Km及IC50
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酶的Km会不会随酶浓度的变化而变化？我认为会，我是这样想的：Km表示酶促反应速度达到Vmax值一半时的底物浓度[S]。如果酶浓度变大，则达到1/2Vmax时的所需的底物浓度会变大，那么Km值会变大。这样的话我觉得Km就无法客观表示酶与底物的亲和力强弱了，除非说明酶浓度。 另一个问题是关于IC50值的，体系的酶浓度会不会影响IC50值？我认为会，并且认为IC50不具有客观表现抑制剂抑制强弱的能力，除非在用IC50值时说明酶浓度。 |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-05-17 07:59:22
拉风蜗牛王: 金币+3, 谢谢！不过我不同意你的回答。 2013-05-17 20:03:54
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拉风蜗牛王: 金币+3, 谢谢！不过我不同意你的回答。 2013-05-17 20:03:54
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楼主，我的解答希望能给你解惑！ 1. Km：米氏常数（单位：mol/L）,他表示反应速率达到最大反应速率的一半时的底物浓度。Km=（k2+k3）/k1；近似代表酶与底物的亲和力，Km越大，亲和力越小，反之相反！ 2.Km只是一个酶的特征性常量！与底物浓度无关，却与环境的理化因素有关！！！这点和密度很相似！ 所以你的第一个猜想我就不用多说什么了吧？？！！！ 3.IC50：指酶催化反应过程中，被抑制一半时抑制剂的浓度！IC50他是随着底物浓度变化而变化的！前提是你的酶浓度是一定的！这叫控制变量法！一般资料都会有介绍这个酶和抑制剂的相关信息的，如果没有，那你就得做Michaelis-Menten曲线咯！！怎么做你应该知道了吧？？？太长了，不多说了！具体它能不能客观的表示抑制剂能力的强弱问题，除非他在说明酶浓度和底物浓度的前提下··· 好吧，就这么多吧！困了····希望能给你解惑~~~ |
6楼2013-05-16 23:01:39
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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昨天晚上可能太困了，有些地方漏了点东西！现在补上！（对第2条的解释补上！！！） 1）.Km只是一个酶的特征性常量！与底物浓度无关，却与环境的理化因素有关！当然每个酶的Km值是不同的！ 对于每一个酶促反应来说，在一定条件下，他都有特定的值，因此常被用来鉴别酶。不同的酶Km值相差很大，一般为10-3~10-5 mol/L 2). 求Km值一般利用lineweaver—Burk法（双倒数作图法）来求！将V=（Vmax*[S]）/（Km+[S]）变形为1/V=(Km/Vmax)*(1/[S])+1/Vmax.将1/V是关于1/[S]的线性函数（希望能看懂）！令1/V=0，即可得到1/Km=-1/[S](并不表示Km是个负值！！1/Km只表示在1/[S]上的截距！！)此时，Km值已经求出！ 3）.说明一下，那个米氏方程公式只是他的计算公式！！！并不表示他与底物和反应速度的关系！！！！ 举个例子：密度这个单位，大家都很熟悉吧！p=m/V,他是物质的固有属性，他不随物质体积和质量变化而变化的！！但是温度可以改变他！例如水的密度在4度是最大的！这个只是密度的计算公式！并不表示他与质量与体积之间的关系！ 好吧 ，就这么多吧！希望对你有用！！！  |
10楼2013-05-17 20:11:25
2楼2013-05-15 20:42:03
3楼2013-05-15 21:01:04
4楼2013-05-16 20:22:21
5楼2013-05-16 22:23:42
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11楼2013-05-17 20:24:40
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
拉风蜗牛王: 金币+6, 强，这个我理解了！谢谢！ 2013-05-18 10:01:20
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拉风蜗牛王: 金币+6, 强，这个我理解了！谢谢！ 2013-05-18 10:01:20
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再给你解释下！ 这个定义是在确保酶与底物充分反应的条件下进行的！！！ 何为充分？就是酶全部工作，底物浓度足够！ 你提高酶浓度一倍，那它的反应速率也提高一倍，你的最大反应速度也提升了一倍！！！！（你可以查查酶浓度与反应速度的关系，他们是线性的关系！前提是底物浓度足够！！！）从而V=（Vmax*[S]）/（Km+[S]）变形为Km=（Vmax/V-1）*[S]. 你看，有变化吗？？？？？ （将前面所有的所有的“与底物浓度无关”改为“与酶的浓度无关”，包好意思，抱歉！） |
12楼2013-05-17 20:41:51
13楼2013-05-17 20:59:28
14楼2013-05-18 10:06:02
15楼2013-05-18 11:57:33