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[交流]
关于酶的Km及IC50
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酶的Km会不会随酶浓度的变化而变化?我认为会,我是这样想的:Km表示酶促反应速度达到Vmax值一半时的底物浓度[S]。如果酶浓度变大,则达到1/2Vmax时的所需的底物浓度会变大,那么Km值会变大。这样的话我觉得Km就无法客观表示酶与底物的亲和力强弱了,除非说明酶浓度。 另一个问题是关于IC50值的,体系的酶浓度会不会影响IC50值?我认为会,并且认为IC50不具有客观表现抑制剂抑制强弱的能力,除非在用IC50值时说明酶浓度。 |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-05-17 07:59:22
拉风蜗牛王: 金币+3, 谢谢!不过我不同意你的回答。 2013-05-17 20:03:54
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拉风蜗牛王: 金币+3, 谢谢!不过我不同意你的回答。 2013-05-17 20:03:54
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楼主,我的解答希望能给你解惑! 1. Km:米氏常数(单位:mol/L),他表示反应速率达到最大反应速率的一半时的底物浓度。Km=(k2+k3)/k1;近似代表酶与底物的亲和力,Km越大,亲和力越小,反之相反! 2.Km只是一个酶的特征性常量!与底物浓度无关,却与环境的理化因素有关!!!这点和密度很相似! 所以你的第一个猜想我就不用多说什么了吧??!!! 3.IC50:指酶催化反应过程中,被抑制一半时抑制剂的浓度!IC50他是随着底物浓度变化而变化的!前提是你的酶浓度是一定的!这叫控制变量法!一般资料都会有介绍这个酶和抑制剂的相关信息的,如果没有,那你就得做Michaelis-Menten曲线咯!!怎么做你应该知道了吧???太长了,不多说了!具体它能不能客观的表示抑制剂能力的强弱问题,除非他在说明酶浓度和底物浓度的前提下··· 好吧,就这么多吧!困了····希望能给你解惑~~~ |
6楼2013-05-16 23:01:39
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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昨天晚上可能太困了,有些地方漏了点东西!现在补上!(对第2条的解释补上!!!) 1).Km只是一个酶的特征性常量!与底物浓度无关,却与环境的理化因素有关!当然每个酶的Km值是不同的! 对于每一个酶促反应来说,在一定条件下,他都有特定的值,因此常被用来鉴别酶。不同的酶Km值相差很大,一般为10-3~10-5 mol/L 2). 求Km值一般利用lineweaver—Burk法(双倒数作图法)来求!将V=(Vmax*[S])/(Km+[S])变形为1/V=(Km/Vmax)*(1/[S])+1/Vmax.将1/V是关于1/[S]的线性函数(希望能看懂)!令1/V=0,即可得到1/Km=-1/[S](并不表示Km是个负值!!1/Km只表示在1/[S]上的截距!!)此时,Km值已经求出! 3).说明一下,那个米氏方程公式只是他的计算公式!!!并不表示他与底物和反应速度的关系!!!! 举个例子:密度这个单位,大家都很熟悉吧!p=m/V,他是物质的固有属性,他不随物质体积和质量变化而变化的!!但是温度可以改变他!例如水的密度在4度是最大的!这个只是密度的计算公式!并不表示他与质量与体积之间的关系! 好吧 ,就这么多吧!希望对你有用!!! ![]() ![]() ![]() |
10楼2013-05-17 20:11:25
2楼2013-05-15 20:42:03
3楼2013-05-15 21:01:04
4楼2013-05-16 20:22:21
5楼2013-05-16 22:23:42
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8楼2013-05-17 20:01:30
9楼2013-05-17 20:06:14
11楼2013-05-17 20:24:40
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
拉风蜗牛王: 金币+6, 强,这个我理解了!谢谢! 2013-05-18 10:01:20
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拉风蜗牛王: 金币+6, 强,这个我理解了!谢谢! 2013-05-18 10:01:20
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再给你解释下! 这个定义是在确保酶与底物充分反应的条件下进行的!!! 何为充分?就是酶全部工作,底物浓度足够! 你提高酶浓度一倍,那它的反应速率也提高一倍,你的最大反应速度也提升了一倍!!!!(你可以查查酶浓度与反应速度的关系,他们是线性的关系!前提是底物浓度足够!!!)从而V=(Vmax*[S])/(Km+[S])变形为Km=(Vmax/V-1)*[S]. 你看,有变化吗????? (将前面所有的所有的“与底物浓度无关”改为“与酶的浓度无关”,包好意思,抱歉!) |
12楼2013-05-17 20:41:51
13楼2013-05-17 20:59:28
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