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tiger530

铜虫 (正式写手)

[求助] 请教关于P450体外孵育代谢的问题

请教关于P450体外孵育代谢的问题：
1.阳性抑制对照组为什么要加入不同浓度的抑制剂，和计算IC50的意义？
2.Dixon与Lineweaver-Burk作图的意义？
谢谢！
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1楼 2012-05-09 22:51:42
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-05-10 09:57:49
tiger530: 金币+10, ★★★很有帮助, 非常感谢！！！ 2012-05-10 17:25:05
一般在进行酶归属的时候，只需要做1-2个抑制剂浓度，不需要计算IC50，只说明是那种亚型介导代谢即可，有时候因为直接高浓度非选择性抑制剂会对几种亚型都有抑制，所以加一个低浓度的，更能说明问题。
在计算抑制剂的Ki等抑制常数时，通常需要做4-5个抑制剂浓度，并且4-5个底物浓度
计算Ki时，Lineweaver-Burk作图可以很清楚的看出来抑制类型，直线交于x轴是非竞争型抑制，交于y轴是竞争型抑制，交于第三象限是混合型抑制
而Dixon作图的交点是Ki，现在一般多用软件计算
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2楼2012-05-10 08:35:02
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tiger530

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-05-10 08:35:02:
一般在进行酶归属的时候，只需要做1-2个抑制剂浓度，不需要计算IC50，只说明是那种亚型介导代谢即可，有时候因为直接高浓度非选择性抑制剂会对几种亚型都有抑制，所以加一个低浓度的，更能说明问题。
在计算抑制 ...

非常感谢，受益匪浅！请问Dixon与Lineweaver-Burk的软件在哪里可以下载？还有数据的处理与计算一般用那个软件比较好？谢谢！
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3楼2012-05-10 17:28:43
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
用excel就可以实现两种作图
Dixon作图是用1/v对I作图（v是速率，I是抑制剂浓度）
Lineweaver-Burk作图是用1/v对1/s作图（v是速率，s是底物浓度）
graphpad prism 软件或者origin 都可以，网上有破解版
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4楼2012-05-10 18:01:33
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tiger530

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-05-10 18:01:33:
用excel就可以实现两种作图
Dixon作图是用1/v对I作图（v是速率，I是抑制剂浓度）
Lineweaver-Burk作图是用1/v对1/s作图（v是速率，s是底物浓度）
graphpad prism 软件或者origin 都可以，网上有破解版

好的，谢谢！我是北京协和这边的学生，主要也是做代谢方面，但是才刚入门，有很多东西还不会，想多向您多学习，您方便留一个联系方式吗？谢谢！
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5楼2012-05-10 18:49:53
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tiger530

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-05-10 18:01:33
用excel就可以实现两种作图
Dixon作图是用1/v对I作图（v是速率，I是抑制剂浓度）
Lineweaver-Burk作图是用1/v对1/s作图（v是速率，s是底物浓度）
graphpad prism 软件或者origin 都可以，网上有破解版

您好！我想请问一下1/v或者v是怎么计算的，是按照米氏方程计算的吗？Vmax和Km都是取固定值吧，用什么软件计算比较方便？谢谢！
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6楼2012-06-26 15:52:49
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