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tiger530

铜虫 (正式写手)

[求助] 请教关于P450体外孵育代谢的问题

请教关于P450体外孵育代谢的问题:
1.阳性抑制对照组为什么要加入不同浓度的抑制剂,和计算IC50的意义?
2.Dixon与Lineweaver-Burk作图的意义?
谢谢!
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与! 2012-05-10 09:57:49
tiger530: 金币+10, ★★★很有帮助, 非常感谢!!! 2012-05-10 17:25:05
一般在进行酶归属的时候,只需要做1-2个抑制剂浓度,不需要计算IC50,只说明是那种亚型介导代谢即可,有时候因为直接高浓度非选择性抑制剂会对几种亚型都有抑制,所以加一个低浓度的,更能说明问题。
在计算抑制剂的Ki等抑制常数时,通常需要做4-5个抑制剂浓度,并且4-5个底物浓度
计算Ki时,Lineweaver-Burk作图可以很清楚的看出来抑制类型,直线交于x轴是非竞争型抑制,交于y轴是竞争型抑制,交于第三象限是混合型抑制
而Dixon作图的交点是Ki,现在一般多用软件计算
2楼2012-05-10 08:35:02
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tiger530

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-05-10 08:35:02:
一般在进行酶归属的时候,只需要做1-2个抑制剂浓度,不需要计算IC50,只说明是那种亚型介导代谢即可,有时候因为直接高浓度非选择性抑制剂会对几种亚型都有抑制,所以加一个低浓度的,更能说明问题。
在计算抑制 ...

非常感谢,受益匪浅!请问Dixon与Lineweaver-Burk的软件在哪里可以下载?还有数据的处理与计算一般用那个软件比较好?谢谢!
3楼2012-05-10 17:28:43
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

用excel就可以实现两种作图
Dixon作图是用1/v对I作图(v是速率,I是抑制剂浓度)
Lineweaver-Burk作图是用1/v对1/s作图(v是速率,s是底物浓度)
graphpad prism 软件或者origin 都可以,网上有破解版
4楼2012-05-10 18:01:33
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tiger530

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-05-10 18:01:33:
用excel就可以实现两种作图
Dixon作图是用1/v对I作图(v是速率,I是抑制剂浓度)
Lineweaver-Burk作图是用1/v对1/s作图(v是速率,s是底物浓度)
graphpad prism 软件或者origin 都可以,网上有破解版

好的,谢谢!我是北京协和这边的学生,主要也是做代谢方面,但是才刚入门,有很多东西还不会,想多向您多学习,您方便留一个联系方式吗?谢谢!
5楼2012-05-10 18:49:53
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tiger530

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-05-10 18:01:33
用excel就可以实现两种作图
Dixon作图是用1/v对I作图(v是速率,I是抑制剂浓度)
Lineweaver-Burk作图是用1/v对1/s作图(v是速率,s是底物浓度)
graphpad prism 软件或者origin 都可以,网上有破解版

您好!我想请问一下1/v或者v是怎么计算的,是按照米氏方程计算的吗?Vmax和Km都是取固定值吧,用什么软件计算比较方便?谢谢!
6楼2012-06-26 15:52:49
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