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肝微粒体的体外代谢
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xin_yue11
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肝微粒体的体外代谢
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我做肝微粒体体外孵育,孵育体系如下:肝微粒体1mg/ml,非那西丁浓度为20ug/ml,NADPH浓度为1mmol/l ,用PBS补充至500ul,实验操作如下:依次加入肝微粒体,非那西丁,pbs,预孵育5min后,加入NADPH,在37度下,孵育30min,但是发现非那西丁几乎没有代谢,为什么?
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【求助】求教肝微粒体体外代谢实验问题
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1楼
2013-10-10 17:42:03
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楼主,你好,我最近也在做肝微粒体代谢,现在数据出来了,CLint不知道怎么计算,不知道楼主是否能提供帮助。
肝微粒体1mg/ml,待测化合为3uM/L,反应体系100ul,15min和60min浓度为 2.8uM/L和1.83uM/L.谢谢。求计算方法
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2楼
2013-10-11 10:50:27
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xin_yue11
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2楼
:
Originally posted by
fraser
at 2013-10-11 10:50:27
楼主,你好,我最近也在做肝微粒体代谢,现在数据出来了,CLint不知道怎么计算,不知道楼主是否能提供帮助。
肝微粒体1mg/ml,待测化合为3uM/L,反应体系100ul,15min和60min浓度为 2.8uM/L和1.83uM/L.谢谢。求计算方 ...
我也不清楚啊,查阅相关文献也没找到,你做的肝微粒体外孵育体系成功吗
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3楼
2013-10-15 20:42:26
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3楼
:
Originally posted by
xin_yue11
at 2013-10-15 20:42:26
我也不清楚啊,查阅相关文献也没找到,你做的肝微粒体外孵育体系成功吗...
我已经找到方法了 ,在BD的网站上有介绍的
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4楼
2013-10-22 10:23:22
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juliang0612
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2013-10-25 21:03:33
考虑一下酶失活或者微粒体里面的亚型酶含量不够吧(这个可能性小),另外就是你的NADPH启动是不是有什么问题,我以前做的时候好像没用NADPH的现成溶液,但整个孵育没用问题。
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5楼
2013-10-24 22:58:14
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上山捉鱼
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刚做过微粒体体外代谢,你的问题应该是蛋白失活所致
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2013-10-25 09:45:52
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xin_yue11
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6楼
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上山捉鱼
at 2013-10-25 09:45:52
刚做过微粒体体外代谢,你的问题应该是蛋白失活所致
恩,我用s-9做,没问题,好像是NADPH出问题了
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7楼
2013-10-25 21:04:12
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楼主,你的非那西丁是用什么溶解的,最近试了很多方法都不太好,最后用甲醇—水(5:5)溶的,但孵育后基本不代谢,求助
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8楼
2016-01-11 17:14:38
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fraser
at 2013-10-22 10:23:22
我已经找到方法了 ,在BD的网站上有介绍的...
BD网站,我试着搜索,并没有找到介绍方法,请问可以详细说明一下搜索途径吗?谢谢~
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9楼
2017-12-14 10:29:59
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