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急！！！关于肝微粒体一相代谢和二代UGT的问题
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本人想做一个黄酮类化合物的一相代谢和二相代谢的UGT 由于刚刚接触这个领域说以有很多问题，请教大家 1.化合物的溶解 指导原则说化合物若溶解于有机溶液中，不应超过1% 由于用有机溶剂溶解对酶活性有影响 所以我想试着用其他的溶解 看有的文献是用有机溶剂溶解完，用甘油水溶解 由于我的药比较贵，我应该怎么试它的溶解度，方便快捷呢/ 假设我真的用有机溶剂做，是否对酶的活性影响很大呢 2 二相代谢之UGT体系问题 看UGT时，比较懵 有的人体系用的是Tris缓冲液，有的用的是PBS，有的人的Ph是7.4；有的是7.5；有的8.0。 所以想请教最平常的体系是什么？PH是多少？ 穿孔剂大家都用丙甲菌素吗？用什么溶解它？我看文献有的用DMSO？这不是有机溶剂吗？ 为什么用PBS？体系具体的配置是什么？ 3 二相代谢之UGT ：葡萄糖二酸1，4一内酯 看有的人加这个，有的人不加 我用肝微粒体做，是不是不用加这个。 4底物的最低浓度怎么选择 在初试时，或者考察酶反应时间或酶浓度时，大家都用药物的最低浓度 这个最低浓度是怎么确定的啊？ |
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| Alamethicin(丙甲菌素)是用DMSO溶解的，先用一点点DMSO溶解，制备高浓度丙甲菌素溶液，使用时取一点点用PBS或者直接培养基稀释就行了，最终保证DMSO控制在千分之一就行。 |
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