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急!!!关于肝微粒体一相代谢和二代UGT的问题
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本人想做一个黄酮类化合物的一相代谢和二相代谢的UGT 由于刚刚接触这个领域说以有很多问题,请教大家 1.化合物的溶解 指导原则说化合物若溶解于有机溶液中,不应超过1% 由于用有机溶剂溶解对酶活性有影响 所以我想试着用其他的溶解 看有的文献是用有机溶剂溶解完,用甘油水溶解 由于我的药比较贵,我应该怎么试它的溶解度,方便快捷呢/ 假设我真的用有机溶剂做,是否对酶的活性影响很大呢 2 二相代谢之UGT体系问题 看UGT时,比较懵 有的人体系用的是Tris缓冲液,有的用的是PBS,有的人的Ph是7.4;有的是7.5;有的8.0。 所以想请教最平常的体系是什么?PH是多少? 穿孔剂大家都用丙甲菌素吗?用什么溶解它?我看文献有的用DMSO?这不是有机溶剂吗? 为什么用PBS?体系具体的配置是什么? 3 二相代谢之UGT :葡萄糖二酸1,4一内酯 看有的人加这个,有的人不加 我用肝微粒体做,是不是不用加这个。 4底物的最低浓度怎么选择 在初试时,或者考察酶反应时间或酶浓度时,大家都用药物的最低浓度 这个最低浓度是怎么确定的啊? |
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ronaldoli198311
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