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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 肝微粒体的体外代谢
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xin_yue11

新虫 (初入文坛)

[求助] 肝微粒体的体外代谢 已有1人参与

我做肝微粒体体外孵育，孵育体系如下：肝微粒体1mg/ml,非那西丁浓度为20ug/ml，NADPH浓度为1mmol/l  ，用PBS补充至500ul，实验操作如下：依次加入肝微粒体，非那西丁，pbs，预孵育5min后，加入NADPH，在37度下，孵育30min，但是发现非那西丁几乎没有代谢,为什么？
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1楼 2013-10-10 17:42:03
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fraser

银虫 (正式写手)
楼主,你好,我最近也在做肝微粒体代谢，现在数据出来了，CLint不知道怎么计算，不知道楼主是否能提供帮助。
肝微粒体1mg/ml,待测化合为3uM/L，反应体系100ul，15min和60min浓度为 2.8uM/L和1.83uM/L.谢谢。求计算方法
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2楼2013-10-11 10:50:27
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xin_yue11

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fraser at 2013-10-11 10:50:27
楼主,你好,我最近也在做肝微粒体代谢，现在数据出来了，CLint不知道怎么计算，不知道楼主是否能提供帮助。
肝微粒体1mg/ml,待测化合为3uM/L，反应体系100ul，15min和60min浓度为 2.8uM/L和1.83uM/L.谢谢。求计算方 ...

我也不清楚啊，查阅相关文献也没找到，你做的肝微粒体外孵育体系成功吗
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3楼2013-10-15 20:42:26
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fraser

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xin_yue11 at 2013-10-15 20:42:26
我也不清楚啊，查阅相关文献也没找到，你做的肝微粒体外孵育体系成功吗...

我已经找到方法了 ，在BD的网站上有介绍的
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4楼2013-10-22 10:23:22
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juliang0612

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
xin_yue11: 金币+2 2013-10-25 21:03:33
考虑一下酶失活或者微粒体里面的亚型酶含量不够吧（这个可能性小），另外就是你的NADPH启动是不是有什么问题，我以前做的时候好像没用NADPH的现成溶液，但整个孵育没用问题。
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5楼2013-10-24 22:58:14
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上山捉鱼

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

刚做过微粒体体外代谢，你的问题应该是蛋白失活所致
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6楼2013-10-25 09:45:52
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xin_yue11

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 上山捉鱼 at 2013-10-25 09:45:52
刚做过微粒体体外代谢，你的问题应该是蛋白失活所致

恩，我用s-9做，没问题，好像是NADPH出问题了
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7楼2013-10-25 21:04:12
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郑梅

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，你的非那西丁是用什么溶解的，最近试了很多方法都不太好，最后用甲醇—水（5:5）溶的，但孵育后基本不代谢，求助
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眼中有路，心中有光
8楼2016-01-11 17:14:38
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LEE啊哦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fraser at 2013-10-22 10:23:22
我已经找到方法了 ，在BD的网站上有介绍的...

BD网站，我试着搜索，并没有找到介绍方法，请问可以详细说明一下搜索途径吗？谢谢~
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9楼2017-12-14 10:29:59
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