应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有人用NADPH做过实验吗
241/3返回列表123下一页
查看: 3189  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

[求助] 有人用NADPH做过实验吗 已有1人参与

我想做一种酶的活性检测，可是这种酶测活性需要NADPH,我购买的是NADPH-Na4，粉末状，具体测活性的话该怎么配置，怎么加呢？购买的NADPH粉末量很少，估计只能溶解后再做实验。有没有做过的，指点一下啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-03 12:55:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励发贴交流和应助！ 2013-03-17 22:25:27
NADPH是辅酶，终浓度为2-5mM就可以了，我经常做酶活检测，我们都是投反应，测酶活。氧化还原酶都需要这些辅酶，
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-03 17:22:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lishaohe at 2013-03-03 17:22:34
NADPH是辅酶，终浓度为2-5mM就可以了，我经常做酶活检测，我们都是投反应，测酶活。氧化还原酶都需要这些辅酶，

你测得是NADPH的减少量吗
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-03 18:12:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你是用酶标仪测340nm的OD值变化吗？我们也做过，不过大部分都是直接看底物的生成，直接送HPLC
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-03 18:38:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kabuqinuo89: 金币+2 2013-03-04 10:58:56
如果你加的是NADPH来反应测酶活，OD肯定是变低的，因为NADPH在340nm有吸收峰，而反应后的NADP+没有吸收峰，因而如果酶参加了反应，OD肯定是降低的。通过公式可以计算酶活。
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-03 18:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lishaohe at 2013-03-03 18:44:00
如果你加的是NADPH来反应测酶活，OD肯定是变低的，因为NADPH在340nm有吸收峰，而反应后的NADP+没有吸收峰，因而如果酶参加了反应，OD肯定是降低的。通过公式可以计算酶活。

我现在就是测NADPH得减少量，可是我的反应再不加酶的情况下，单独只有NADPH的话OD值是不变的，可是只要一加入底物，OD值就一直飙升，我也不知道是为什么 求解啊
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-04 10:58:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
kabuqinuo89: 金币+1 2013-03-06 10:35:29
做个不加酶，加底物和其他试剂看看OD值有什么变化（增加对照试验）。我们实验室做的一般只要是加了NADPH，如果反应了，OD肯定是下降的。
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-04 20:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李艳君2011

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kabuqinuo89: 金币+1 2013-03-06 10:35:34
NADPH不稳定啊，放那时间长了，值就会降低。建议投还原的实验，用NADP生成NADPH。看OD340的生成
赞一下 回复此楼
8楼2013-03-05 09:58:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lishaohe at 2013-03-04 20:41:16
做个不加酶，加底物和其他试剂看看OD值有什么变化（增加对照试验）。我们实验室做的一般只要是加了NADPH，如果反应了，OD肯定是下降的。

你们做实验的缓冲液是什么呢  我用的Tris-Hcl还好，OD不会变。可是用磷酸钾的话OD就会降低，不知道怎么回事。你们用的什么缓冲液呢
赞一下 回复此楼
9楼2013-03-06 10:35:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Tris-HCl和PB都做过。一般都是用PB，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠
赞一下 回复此楼
10楼2013-03-06 22:12:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kabuqinuo89 的主题更新
241/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +3 yuleib84 2026-08-25 4/200 2026-08-25 13:31 by zjjcn2001
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 +3 ziyangfang 2026-08-25 3/150 2026-08-25 13:14 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +19 羊腰板 2026-08-21 22/1100 2026-08-25 10:38 by popular289
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +17 kkkl_v 2026-08-19 18/900 2026-08-25 09:41 by windflowerwy
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭