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清清柳岸枫

铁虫 (小有名气)

[求助] 请教大鼠血浆标准曲线问题 已有4人参与

在做标曲实验时,比如我用了200 μl的血浆,加入了浓度为100 ng/ml的药物甲醇溶液200 μl,后面用200μl的流动相复溶。那我在算这个标曲的血药浓度时需要考虑加入的甲醇的量吗?就是说这个点的血药浓度是按100 ng/ml算还是按50 ng/ml算呢?
谢谢
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richbird

捐助贵宾 (著名写手)

小木虫二手科学家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
清清柳岸枫: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2014-03-22 07:48:36
你描述省略了好几个步骤,我猜测如下:标准曲线制备方法为空白血浆200uL,加入浓度为100 ng/mL的药物甲醇溶液200uL,震荡沉淀蛋白。提取上清,挥干。然后用200 uL的流动相复溶。待测样品为
200 uL血浆加入200uL甲醇,后续操作同标准曲线。
假如是这样,那么你标曲里面的浓度应当为100 ng/mL,而不是50 ng/mL。
另外,提醒一下,你这种提取方法会有争议。
一步步实现自己的理想,永远不要停下脚步。
3楼2014-03-18 14:25:14
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wsh14

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+3, 鼓励应助 2014-03-17 13:05:38
清清柳岸枫: 金币+1, 有帮助 2014-03-22 07:48:47
需要,不同浓度都要用200μl。由于提取率的问题,不能说所要药物都提取出来,然后除以复溶溶剂体积来算浓度。因为血浆有200μl,所以还是按50ng/ml算。
2楼2014-03-17 11:54:15
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hanxizhen

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我自己当初在做药动试验的时候,做血样的标准曲线时,将对照品和自己的检测血样都是在同一个条件下进行制备的,所以没有考虑加入甲醇的量,因为是平行的。
加油
4楼2014-03-18 16:14:48
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清清柳岸枫

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by richbird at 2014-03-18 14:25:14
你描述省略了好几个步骤,我猜测如下:标准曲线制备方法为空白血浆200uL,加入浓度为100 ng/mL的药物甲醇溶液200uL,震荡沉淀蛋白。提取上清,挥干。然后用200 uL的流动相复溶。待测样品为
200 uL血浆加入200uL甲醇 ...

谢谢,我不是用沉淀蛋白做的,我是这样:标准曲线制备方法为空白血浆200uL,加入浓度为100 ng/mL的药物甲醇溶液200uL,振荡,加入乙酸乙酯3ml,振荡,离心,取上清,吹干,200 uL的流动相复溶。然后浓度我是按100 ng/mL算的……
5楼2014-03-19 08:50:26
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