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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 请教大鼠血浆标准曲线问题
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清清柳岸枫

铁虫 (小有名气)

[求助] 请教大鼠血浆标准曲线问题 已有4人参与

在做标曲实验时，比如我用了200 μl的血浆，加入了浓度为100 ng/ml的药物甲醇溶液200 μl，后面用200μl的流动相复溶。那我在算这个标曲的血药浓度时需要考虑加入的甲醇的量吗？就是说这个点的血药浓度是按100 ng/ml算还是按50 ng/ml算呢？
谢谢
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1楼 2014-03-16 16:53:02
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wsh14

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+3, 鼓励应助 2014-03-17 13:05:38
清清柳岸枫: 金币+1, ★有帮助 2014-03-22 07:48:47
需要，不同浓度都要用200μl。由于提取率的问题，不能说所要药物都提取出来，然后除以复溶溶剂体积来算浓度。因为血浆有200μl，所以还是按50ng/ml算。
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2楼2014-03-17 11:54:15
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richbird

捐助贵宾 (著名写手)

小木虫二手科学家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
清清柳岸枫: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2014-03-22 07:48:36
你描述省略了好几个步骤，我猜测如下：标准曲线制备方法为空白血浆200uL，加入浓度为100 ng/mL的药物甲醇溶液200uL，震荡沉淀蛋白。提取上清，挥干。然后用200 uL的流动相复溶。待测样品为
200 uL血浆加入200uL甲醇，后续操作同标准曲线。
假如是这样，那么你标曲里面的浓度应当为100 ng/mL，而不是50 ng/mL。
另外，提醒一下，你这种提取方法会有争议。
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一步步实现自己的理想，永远不要停下脚步。
3楼2014-03-18 14:25:14
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hanxizhen

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我自己当初在做药动试验的时候，做血样的标准曲线时，将对照品和自己的检测血样都是在同一个条件下进行制备的，所以没有考虑加入甲醇的量，因为是平行的。
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加油
4楼2014-03-18 16:14:48
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清清柳岸枫

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by richbird at 2014-03-18 14:25:14
你描述省略了好几个步骤，我猜测如下：标准曲线制备方法为空白血浆200uL，加入浓度为100 ng/mL的药物甲醇溶液200uL，震荡沉淀蛋白。提取上清，挥干。然后用200 uL的流动相复溶。待测样品为
200 uL血浆加入200uL甲醇 ...

谢谢，我不是用沉淀蛋白做的，我是这样：标准曲线制备方法为空白血浆200uL，加入浓度为100 ng/mL的药物甲醇溶液200uL，振荡，加入乙酸乙酯3ml，振荡，离心，取上清，吹干，200 uL的流动相复溶。然后浓度我是按100 ng/mL算的……
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5楼2014-03-19 08:50:26
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richbird

捐助贵宾 (著名写手)

小木虫二手科学家
引用回帖:
5楼: Originally posted by 清清柳岸枫 at 2014-03-19 08:50:26
谢谢，我不是用沉淀蛋白做的，我是这样：标准曲线制备方法为空白血浆200uL，加入浓度为100 ng/mL的药物甲醇溶液200uL，振荡，加入乙酸乙酯3ml，振荡，离心，取上清，吹干，200 uL的流动相复溶。然后浓度我是按100  ...

根据当前的提取方法，按照100 ng/mL计算是正确的。
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一步步实现自己的理想，永远不要停下脚步。
6楼2014-03-20 09:13:45
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

血浆200ul，最后体积还是200ul，那么你的浓度就是血浆中的浓度，100ng/ml；
在往血浆中加化合物的时候可以考虑现将甲醇挥干后加入空白血浆，然后加萃取液；
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7楼2014-03-20 09:27:39
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st.nova2012

新虫 (小有名气)
没有问题，100ng/mL

你样品血浆的处理和加标血浆的处理应当是完全一样的。
空白血浆加过标准品储备液后的处理跟样品处理只要是一样的，就行了，不用再考虑回收率了。不过你既然用甲醇溶解的标准品，那么样品血浆不管你怎么处理，还是要加上这200μL的甲醇的
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8楼2014-03-27 16:33:09
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zhangjingle

新虫 (初入文坛)
只要保证做标准曲线的方法和给药样品的测定方法一样，用100ng/ml和50ng/ml是都可以的，如果你测定标准曲线用的浓度是血浆里边的药物浓度即50ng/ml，那么给药样品就按血浆中的药物浓度即稀释两倍后的；如果测定标准曲线用的浓度是100ng/ml，那么给药样品的测定你就按没有稀释的浓度，也就是流动相稀释后的浓度进行测定就可以了。希望有帮助到你。
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9楼2014-08-22 09:33:04
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清清柳岸枫

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by zhangjingle at 2014-08-22 09:33:04
只要保证做标准曲线的方法和给药样品的测定方法一样，用100ng/ml和50ng/ml是都可以的，如果你测定标准曲线用的浓度是血浆里边的药物浓度即50ng/ml，那么给药样品就按血浆中的药物浓度即稀释两倍后的；如果测定标准曲 ...

多谢，不过已经毕业啦！
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10楼2014-08-22 14:44:30
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