| 查看: 1637 | 回复: 7 | ||||
neurovas金虫 (小有名气)
|
[求助]
求助帖，看看这段话什么意思？ 已有1人参与
|
|
Hemoglobin from bovine blood was obtained from Sigma. Methemoglobin was prepared by oxidation of Hb with a 2-fold excess of potassium ferricyanide and passage through a Sephadex G-25 column using 10 mM phosphate buffer (pH 7.0) as an eluent. Oxyhemoglobin was obtained by reduction of Hb with a 10-fold excess of sodium dithionite. The solution was then bubbled with O2 and purified on a Sephadex G-25 column. Concentrations of metHb and oxyHb were determined spectrophotometrically using ε405 = 1.79 × 105 M–1 cm–1 and ε500 = 1.00 × 104 M–1 cm–1 for metHb, ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, b, expressed per heme (Antonini & Brunori, 1971). FerrylHb was prepared by incubation 1.5 × 10–5 M MetHb with an equimolar amount of H2O2 in relation to the heme group in 10 mM phosphate buffer at room temperature for 5 min (Sztiller et al., 2006). 重点是 ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, 测完这两个值之后，是相加得出oxyHb的浓度吗？文章里面似乎并没有讲清楚。求助各位高手给解决一下！ 下面附有全文！谢谢！ |
回复此楼» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : Flavonoids_as_reductants_of_ferryl_hemoglobin.pdf
2014-03-08 20:16:28, 871.61 K
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有112人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助:审稿人的这句话是什么意思？
已经有4人回复
- 问问这段话的意思
已经有6人回复
- 大家帮我看看这句话是不是说明是上会被毙掉的？
已经有21人回复
- 求助他达拉非欧洲药典里这段话是啥意思？
已经有7人回复
- 求助一下，这段话我是看的懂，可以意思理解不能啊
已经有6人回复
- 求助稿子中的这句话啥意思
已经有3人回复
- 大家帮着看看，这句话什么意思？
已经有5人回复
- 求助这段话主要含义
已经有4人回复
- 各位亲们，大家帮我看看这段话是什么意思，谢谢！
已经有82人回复
- 【求助】我想问下大家在实验室里用什么方法对原油脱水?
已经有10人回复
- JAVA运行环境未找到--什么意思？
已经有10人回复
- 请问评审意见回来后，Technical Editor的答复等待中是什么意思？
已经有12人回复
- NEB 的双酶切软件 活性中出现EcorI,什么意思
已经有6人回复
- energy fuels审稿意见回，有段话看不太懂
已经有8人回复
- 帮我看看老外这句话是啥意思啊？？
已经有10人回复
- 被reject，说鼓励我修改后再submit这篇文章，这是什么意思？
已经有20人回复
- 论文校样都结束了，IN PRESS中，最后来了个这个，什么意思
已经有14人回复
- 【求助】外导已发邀请信，正在谈学习计划。麻烦大家帮我看一下这句话是什么意思。
已经有13人回复
- 【求助】招生老师回复的法语，不知什么意思
已经有16人回复
- 修改意见中这段话表达什么意思？重点第一句。。。什么要求？
已经有10人回复
- 【求助】求知-NCO/-OH的R比值的具体意思。。
已经有14人回复
- 论文要交出版费，大家帮我看看下面这段话是什么意思？
已经有4人回复
- Manuscript for Board level decision?啥意思？
已经有10人回复
- 【求助】大家帮我看下这段话，我实验怎么就重复不出来，是我曲解这意思了
已经有31人回复
- 【求助】大家帮我看下这段话具体是什么意思，我每句能看懂，但整体不会理解
已经有14人回复
- 【求助】请问做气体吸附时给出的自由空间值是什么意思
已经有16人回复
|
有看过这篇paper么? http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0014579398813458 也提到类似的东西，或许可以给你一点提示…… |
2楼2014-03-21 07:45:45
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10403.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
3楼2014-03-21 09:04:20
neurovas
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 654.3
- 帖子: 57
- 在线: 16.2小时
- 虫号: 2504273
- 注册: 2013-06-08
- 性别: GG
- 专业: 脑血管结构、功能异常及相
4楼2014-03-21 12:49:06
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10403.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
neurovas: 金币+9, ★★★★★最佳答案 2014-03-21 20:29:13
neurovas: 金币+9, ★★★★★最佳答案 2014-03-21 20:29:13
|
我谈谈我的理解 很明显这两个epsilon值相差很大 ε405 = 1.79 × 105 M–1 cm–1 and ε500 = 1.00 × 104 M–1 cm–1 for metHb, 这里405nm是文中提到的max值，理论上测这个值就可以算出metHb的浓度 但是这里有一个问题，就是他metHb是怎么来的？ 他是从Hb氧化而来，而Hb在这个区段同样有很强的光吸收，只要是反应，就不可能是100%的， 所以我觉得他后面选的那个500nm，应该是选的对MetHb而言光吸收很少，但是Hb还有相当光吸收的区段，等于这个是测光的本底，要把405nm处测的MetHb+Hb，减去500 nm处测的Hb本底。 ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, 这个应该是同理 我找到的Hb和OxyHb的吸收光谱图 很明显到了577nm，OxyHb的光吸收已经很少，而Hb还有相当的光吸收。 供你参考！  QQ截图20140321151039.png |
5楼2014-03-21 15:11:57
neurovas
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 654.3
- 帖子: 57
- 在线: 16.2小时
- 虫号: 2504273
- 注册: 2013-06-08
- 性别: GG
- 专业: 脑血管结构、功能异常及相
6楼2014-03-21 20:29:15
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10403.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
|
就我查了一会，其实怎么定量不同类型的血红蛋白，有很多方法，争议也就在于取什么波长，考虑的无非两点， 第一，待测物在这个波长的光吸收能力要强，这样才能测的准 第二，这个波长，除了待测物之外，其他物质的光吸收要最弱，这样才能干扰小 比如蛋白质和核酸，这个做生化的都知道，一个最大在280，一个在260，但是很明显280处核酸也有相当的吸收，反之亦然。 所以测蛋白，尤其是核酸，要讲究一个260/280的比值，用这个表示纯度。也就是说，根据260光吸收算出来的值准不准，要取决于这个样品纯不纯。 对于血红蛋白而言，这一点更难实现，不管是什么状态的血红蛋白，导致强光吸收能力的还是heme，heme的大pai键，所以导致不管什么类型，他们的最大光吸收波长相差不大，而如果根据选择待测物最大光吸收波长处测量误差最小的原则，就同样伴随着背景最高。 所以我的理解是你引用的方法中，权宜之计只好再选一个，待测物光吸收能力较弱，而已经背景还有相当强光吸收的波段，测得背景。 所以实际操作很简单 每一份样品你都测415nm和577nm，得到两个光吸收值，然后算出浓度 浓度相减，就得到你待测物的理论实际浓度 希望有所帮助 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
neurovas7楼2014-03-22 11:23:35
neurovas
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 654.3
- 帖子: 57
- 在线: 16.2小时
- 虫号: 2504273
- 注册: 2013-06-08
- 性别: GG
- 专业: 脑血管结构、功能异常及相
8楼2014-03-23 00:17:29
15