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neurovas

金虫 (小有名气)

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[求助] 求助帖，看看这段话什么意思？已有1人参与

Hemoglobin from bovine blood was obtained from Sigma. Methemoglobin was prepared by oxidation of Hb with a 2-fold excess of potassium ferricyanide
and passage through a Sephadex G-25 column using 10 mM phosphate buffer (pH 7.0) as an eluent. Oxyhemoglobin was obtained by reduction of Hb with a 10-fold excess of sodium dithionite. The solution was then bubbled with O2 and purified on a Sephadex G-25 column. Concentrations of metHb and oxyHb were determined spectrophotometrically using ε405 = 1.79 × 105 M–1 cm–1 and ε500 = 1.00 × 104 M–1 cm–1 for metHb, ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, b, expressed per heme (Antonini & Brunori, 1971). FerrylHb was prepared by incubation 1.5 × 10–5 M MetHb with an equimolar amount of H2O2 in relation to the heme group in 10 mM phosphate buffer at room temperature for 5 min (Sztiller et al., 2006).

重点是 ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, 测完这两个值之后，是相加得出oxyHb的浓度吗？文章里面似乎并没有讲清楚。求助各位高手给解决一下！
下面附有全文！谢谢！

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附件 1 : Flavonoids_as_reductants_of_ferryl_hemoglobin.pdf

2014-03-08 20:16:28, 871.61 K

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1楼 2014-03-08 20:17:44

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neurovas

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引用回帖:

5楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-21 15:11:57
我谈谈我的理解
很明显这两个epsilon值相差很大
ε405 = 1.79 × 105 M–1 cm–1 and ε500 = 1.00 × 104 M–1 cm–1 for metHb,
这里405nm是文中提到的max值，理论上测这个值就可以算出metHb的浓度
但是这里 ...

虽然我看不懂，但肯定是遇见高人了，我是神经外科，干临床的，对这个不太懂！那你的意思是：我测出ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, 这两个值之后，相减就是我要的OxyHb的浓度了吗？求赐教！