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neurovas

金虫 (小有名气)

[求助] 求助帖,看看这段话什么意思? 已有1人参与

Hemoglobin from bovine blood was obtained from Sigma. Methemoglobin was prepared by oxidation of Hb with a 2-fold excess of potassium ferricyanide
and passage through a Sephadex G-25 column using 10 mM phosphate buffer (pH 7.0) as an eluent. Oxyhemoglobin was obtained by reduction of Hb with a 10-fold excess of sodium dithionite. The solution was then bubbled with O2 and purified on a Sephadex G-25 column. Concentrations of metHb and oxyHb were determined spectrophotometrically using ε405 = 1.79 × 105 M–1 cm–1 and ε500 = 1.00 × 104 M–1 cm–1 for metHb, ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, b, expressed per heme (Antonini & Brunori, 1971). FerrylHb was prepared by incubation 1.5 × 10–5 M MetHb with an equimolar amount of H2O2 in relation to the heme group in 10 mM phosphate buffer at room temperature for 5 min (Sztiller et al., 2006).

重点是 ε415 = 1.25 × 105 M–1 cm–1 and ε577 = 1.38 × 104 M–1 cm–1 for oxyHb, 测完这两个值之后,是相加得出oxyHb的浓度吗?文章里面似乎并没有讲清楚。求助各位高手给解决一下!
下面附有全文!谢谢!
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  • 附件 1 : Flavonoids_as_reductants_of_ferryl_hemoglobin.pdf
  • 2014-03-08 20:16:28, 871.61 K

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neurovas

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-22 11:23:35
就我查了一会,其实怎么定量不同类型的血红蛋白,有很多方法,争议也就在于取什么波长,考虑的无非两点,
第一,待测物在这个波长的光吸收能力要强,这样才能测的准
第二,这个波长,除了待测物之外,其他物质的 ...

谢谢!
8楼2014-03-23 00:17:29
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littant

银虫 (小有名气)

有看过这篇paper么?
http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0014579398813458

也提到类似的东西,或许可以给你一点提示……
2楼2014-03-21 07:45:45
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
neurovas(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-21 10:31:05
neurovas: 金币+10, 有帮助 2014-03-21 12:49:44
这个epsilon是光吸收中的摩尔消光系数
告诉你的是理论值
然后你去测这两个波长的光,用比尔-朗博公式算浓度
3楼2014-03-21 09:04:20
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neurovas

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-21 09:04:20
这个epsilon是光吸收中的摩尔消光系数
告诉你的是理论值
然后你去测这两个波长的光,用比尔-朗博公式算浓度

但是为什么给了两个公式呢,一个不就够用了吗

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-03-21 12:49:06
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