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zmclk

银虫 (小有名气)

[求助] 双向电泳,如何选择蛋白定量的方法? 已有2人参与

如图所示,用UTC裂解液提取蛋白,该用BSA定量还是BCA定量蛋白呢?
双向电泳,如何选择蛋白定量的方法?
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jiclong521

新虫 (初入文坛)

我们实验室就用的BSA
2楼2014-02-26 20:32:44
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
都一样的吧,不过貌似BSA比较好

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
3楼2014-02-26 23:17:57
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2009jxncmeet

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用BSA要好些,BCA的会偏大
潜移默化地不断追求科研真谛
4楼2014-02-27 09:34:17
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zmclk

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 2009jxncmeet at 2014-02-27 09:34:17
用BSA要好些,BCA的会偏大

如果有DTT,会干扰BSA,怎么办呢?
5楼2014-02-27 21:44:59
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2009jxncmeet

金虫 (小有名气)

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢补充 2014-03-01 10:12:17
引用回帖:
5楼: Originally posted by zmclk at 2014-02-27 21:44:59
如果有DTT,会干扰BSA,怎么办呢?...

你上面的裂解液中没有DTT啊,况且有的话只要小于1mM的话,也是影响可以忽略。
潜移默化地不断追求科研真谛
6楼2014-03-01 09:35:22
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zmclk

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 2009jxncmeet at 2014-03-01 09:35:22
你上面的裂解液中没有DTT啊,况且有的话只要小于1mM的话,也是影响可以忽略。...

如果用这种裂解液,是不是就不能用BSA法定量?我现在在纠结用哪种裂解液,唉~~~~
                              最终浓度
尿素FW(60.06)          7M
硫脲FW(76.12)        2M
CHAPS                       4%(W/v)
IPG缓冲液                        2%(v/v)
DTT(FW154.2)        40mM
7楼2014-03-03 14:22:44
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2009jxncmeet

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zmclk at 2014-03-03 14:22:44
如果用这种裂解液,是不是就不能用BSA法定量?我现在在纠结用哪种裂解液,唉~~~~
                              最终浓度
尿素FW(60.06)          7M
硫脲FW(76.12)        2M
CHAPS                       4%(W/v)
IPG缓冲液               ...

你最后的DTT 应该是Tris的含量吧?裂解液在配置的时候是不要加DTT的,只有在使用的时候加。
潜移默化地不断追求科研真谛
8楼2014-03-05 08:36:45
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zmclk

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 2009jxncmeet at 2014-03-05 08:36:45
你最后的DTT 应该是Tris的含量吧?裂解液在配置的时候是不要加DTT的,只有在使用的时候加。...

就是DTT的含量。是的,用的时候再加,这个是最终浓度。你觉得和上面的裂解液配方,哪种比较好?
9楼2014-03-05 10:24:23
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