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天马0825

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母培养中的发酵液挥发问题 已有5人参与

各位虫友,小女子在做毕赤酵母,但培养周期较长,一个周期一个礼拜。在此过程中想要测得表达的目标蛋白和菌的生物量随时间的变化规律,但苦于周期长,菌液的挥发不得不考虑在内,这样子我的生长曲线便不能简单的只测OD600了,应该怎么做呢?
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自信加努力成就人生
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天马0825

银虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by baoqie121314 at 2014-02-14 14:01:35
你培养温度多少,室内温度多少啊,可以培养时,培养基相应的多一些,成比例看看

谢谢,我温度23度。发酵液很少的摇瓶250ml装25ml
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7楼2014-02-16 15:32:56
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天马0825

银虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by loasers at 2014-02-14 16:21:37
计算单位时间增发量,将增发量考虑进去。如果是摇床的话提高摇床间湿度,尽量减少增发量。

谢谢,我现在也在考虑这个。请问蒸发量应该具体怎么考虑在内啊
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8楼2014-02-16 15:35:55
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天马0825

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 一直甜蜜蜜 at 2014-02-16 09:45:15
测量初始体积和终体积,计算出每小时挥发量,就能计算出每次测样时的真是体积

我的发酵液装的很少,挥发跟液体体积也有很大关系吧,我准备多些摇瓶,每天取出两瓶,测剩余体积!
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9楼2014-02-16 15:39:56
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天马0825

银虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by vetzhang at 2014-02-16 13:08:35
若是发酵罐发酵表达的话,配备加样瓶自动补料,摇瓶的话,怎大培养箱内温度。

我用的摇瓶,每次摇床里都要放些水,增大湿度
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10楼2014-02-16 16:00:38
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天马0825

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 战斗节能 at 2014-02-16 11:29:16
考虑过直接补加无菌水吗?

谢谢,这个考虑过,周期长,一方面是感觉麻烦,在一方面是怕染菌!
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11楼2014-02-16 16:01:58
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天马0825

银虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by baoqie121314 at 2014-02-17 09:57:05
最好办法就是多摇一些(200ml),尽量忽略蒸发,再摇菌时,接种量也增倍(8倍),不要放在通风处和有阳光处...

谢谢,我的是重组菌,对氧的需求很大,所以不能装的很多。
自信加努力成就人生
15楼2014-02-17 16:06:40
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天马0825

银虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by loasers at 2014-02-17 08:01:26
采用重量法,如果是小罐的话每隔一小时称一下重量,大罐的话如果没有称量系统就不好弄了,只能从长时间的体积变化估测平均值了。...

谢谢,我现在还是摇瓶水平。
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16楼2014-02-17 16:07:23
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天马0825

银虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by huangrui1988 at 2014-02-17 18:03:36
你可以通过control来看看蒸发量多少啊,然后扣除或者补齐就好啦。

嗯  谢谢 现在正在这么做着
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18楼2014-02-17 20:03:23
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天马0825

银虫 (小有名气)

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19楼: Originally posted by baoqie121314 at 2014-02-18 13:02:06
呵呵,用2L瓶子摇菌不一样吗,都是10%...

谢谢你,条件有限,现在在考虑用500ml摇瓶。
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20楼2014-02-18 15:19:36
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