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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母MD平板培养基不凝固的问题
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cuicchao

金虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母MD平板培养基不凝固的问题

小弟请教一下，前两天制备了几个毕赤酵母生长用的MD平板，放了两三天了，结果还没凝固，同学说是PH的问题，就把YNB，生物素，葡萄糖混合后测了PH值，结果显示PH5.1，我用NaOH调PH至6.5，却发现产生了白色沉淀，不知道这什么东西，有谁遇到过这样的问题，指教一下吧！
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好心态；年轻派
1楼 2013-04-12 15:24:36
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回帖置顶 ( 共有1个 )

小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cuicchao(gyesang代发): 金币+3, 鼓励回帖交流经验！ 2013-04-28 17:26:14
gyesang: 回帖置顶 2013-04-28 17:26:16
我来吧、
最近也在做这个
我们实验室的传统就是
称好琼脂 葡萄糖
在114℃下灭菌30min
然后等到不烫了
加入对应的YNB还有生物素
然后倒板
然后就凝固了
你不妨试试吧
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做出色的科研人
4楼2013-04-12 20:42:38
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zsykk123

金虫 (正式写手)
★
cuicchao(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-13 10:24:55
请问你以前出现过这种情况吗？我一般是这样配的：先将YNB加琼脂混匀高压灭菌，灭好等温度降低50-60度左右加入过滤除菌的生物素，葡萄糖溶液，最后到平板即可。
赞一下(1人) 回复此楼
ｍｙ
2楼2013-04-12 17:01:30
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manzibaby

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我个人也曾遇到这样的问题，灭菌后发现培养基有不容的小颗粒，放了一天都不能凝。你可以先将加好琼脂的培养基放入微波炉内加热，待琼脂溶解后再进行灭菌，这样就可以了
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9楼2013-08-12 17:04:01
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普通回帖

cuicchao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zsykk123 at 2013-04-12 17:01:30
请问你以前出现过这种情况吗？我一般是这样配的：先将YNB加琼脂混匀高压灭菌，灭好等温度降低50-60度左右加入过滤除菌的生物素，葡萄糖溶液，最后到平板即可。

自从配MD平板都觉得凝固不好。YNB可以高压么？YNB里面不是含有一些维生素什么的。
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好心态；年轻派
3楼2013-04-12 17:32:20
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cuicchao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小科研女dow at 2013-04-12 20:42:38
我来吧、
最近也在做这个
我们实验室的传统就是
称好琼脂 葡萄糖
在114℃下灭菌30min
然后等到不烫了
加入对应的YNB还有生物素
然后倒板
然后就凝固了
你不妨试试吧

哦！有人说PH值很关键，我今天调到6.5结果还是没凝固好，我就无语了！
赞一下 回复此楼
好心态；年轻派
5楼2013-04-12 21:27:47
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by cuicchao at 2013-04-12 21:27:47
哦！有人说PH值很关键，我今天调到6.5结果还是没凝固好，我就无语了！...

你试试再告诉我结果吧
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做出色的科研人
6楼2013-04-12 21:48:43
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zsykk123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by cuicchao at 2013-04-12 17:32:20
自从配MD平板都觉得凝固不好。YNB可以高压么？YNB里面不是含有一些维生素什么的。...

哦对，我是配的10*的，然后过滤除菌。
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ｍｙ
7楼2013-04-13 10:39:28
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爱上文慧

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cuicchao(gyesang代发): 金币+2, 鼓励发贴交流，为楼主问题解决提供可能的线索！ 2013-04-28 17:26:32
我的也出现过这种现象，原因有二：
一、ph太低，但是MD板应该不会出现这种问题
二、琼脂不好，应该换一种质量稍微好一点的，我以前订的那种琼脂就是凝固不了，后来换了一家就好多了
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每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
8楼2013-04-15 11:19:18
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cuicchao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by manzibaby at 2013-08-12 17:04:01
我个人也曾遇到这样的问题，灭菌后发现培养基有不容的小颗粒，放了一天都不能凝。你可以先将加好琼脂的培养基放入微波炉内加热，待琼脂溶解后再进行灭菌，这样就可以了

咦！这样也行啊，呵呵！不过后来我把琼脂加到2.0%就好了。
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好心态；年轻派
10楼2013-08-13 01:53:44
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