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一休陈金虫 (正式写手)
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[求助]
关于二倍体酿酒酵母基因敲除的疑问 已有2人参与
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各位虫友大家新年好。 我最近开始做二倍体酿酒酵母基因的敲除工作，现在遇到两个疑问：其一，构建一个（上游同源臂+G418抗性基因+下游同源臂）的敲除盒，一次转化，有没有可能将两个等位基因同时敲除？这样的话，我用菌落PCR验证，P不出来目的基因条带的且带有G418抗性的菌落岂不就是敲除的阳性菌落？ 其二，如果第一点不成立，即是一个敲除盒经过一次转化只能敲除一个等位基因的话，第二个基因我怎么敲除呢？还望有二倍体酿酒酵母敲除经验的虫友们多多指教！再次祝福大家新年快乐，马年龙马精神，百尺竿头，更进一步！谢谢。 |
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一休陈
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单倍体的分离，我没有找到合适的文献。看到几篇中文文献，怕做不出来。主要是我对自己的技术有些担心。觉得再去分离单倍体貌似更加麻烦。不知道你分离过单倍体吗？如果做过酿酒酵母单倍体的分离，能否把你做酿酒酵母单倍体的方法发给我一下呢？我的邮箱xi_zhilang@126.com。万分感谢。 |
9楼2014-02-14 09:03:18
2楼2014-02-12 16:31:17
yuanbo934
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3楼2014-02-13 15:21:40
一休陈
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4楼2014-02-13 15:23:46
