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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 抗性板上长出粉色菌落
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中鸟剑客

铜虫 (初入文坛)

[求助] 抗性板上长出粉色菌落 已有3人参与

最近构建质粒一直都不顺利，长出菌落但是最后检查发现都不对，我把用过的amp 和spect 的板放在室温（因为都已经检测不对，所以我就没管它们），几天后我要扔的时候发现这两种板上居然都长出好多粉色的菌落，凡是我检测不对的板上都有，而另外两个肯定对的板上就没有。我想知道是不是我有什么东西污染了，才会导致我的构建一直都做不出来，长出这么多的杂菌。
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1楼 2014-01-21 10:18:17
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
杂菌污染了
重新做过
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2楼2014-01-21 10:32:42
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中鸟剑客

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2014-01-21 10:32:42
杂菌污染了
重新做过

我的感受态是买的，板子别人也用过没问题，是我的质粒被污染了吗？
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3楼2014-01-21 12:38:22
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
中鸟剑客: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-01-21 14:47:05
质粒基本很少染菌的
可能是你的板合不拢，染菌了
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4楼2014-01-21 14:04:24
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的板子污染了，再重新倒些板子。
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hehe
5楼2014-01-21 17:10:30
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baihaer

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

板子长出杂菌跟你的质粒关系不大，问题是在你保存过程。如果同一批板子都没长杂菌就你转化的长了，可以肯定不是板子本身问题，你最好转化后直接用封口膜封闭，37度长出菌落后转入4度保存。在常温未用封口膜封闭的情况下很容易长菌。建议楼主你这种情况可以尝试把板子的AMP浓度（工作浓度100μg/ml）提高一点，这样可以把非质粒的杂菌可能性完全排除。
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没有SB的事，只有SB的人
6楼2014-01-26 10:46:07
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baihaer

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-26 13:09:35
质粒构建不出来时建议你最好在PCR反应和酶切反应后都跑一下DNA胶做一下鉴定，先确定自己每部反应是否正确，然后连接环节反应时间长一点，用经典转化涂板。相信多做几次积累了经验应该就会好做很多。
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没有SB的事，只有SB的人
7楼2014-01-26 10:50:22
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