| 查看: 4200 | 回复: 18 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
酵母基因敲除，PCR验证遇到的问题。 已有4人参与
|
||
|
这是我的PCR验证酵母基因敲除（方法就是常用的同源重组法，醋酸锂转化）泳道1出现的是从pUG6扩增disruption cassette 的一对引物，2-5泳道是A-B，6-9泳道是C-D，10-13泳道是A-D，（其中A、D是目的基因两侧的引物，B、C是目的基因内部的引物，B-M、C-M是marker内部的引物）不过，A、B-M和C-M、D并没有条带，所有样品都是用酵母菌液（冻融处理）作为模版。 我的问题是，我的A-D条带大小说明目的基因还在，且A-B，C-D的条带也说明了这点，但是为什么我的泳道1还有大小与我的disruption cassette 相同的条带呢？而且我今天做了个disruptionF，B-M和C-M，disruptionR两对引物，都有大小与预期相同的条带。说明disruption cassette 已经在酵母细胞中了。。。没有发生同源重组？ 各位分析一下什么情况……  yeast2 编辑.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有241人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 毕赤酵母电转后PCR验证问题
已经有6人回复
- 酵母OCH1基因敲除
已经有5人回复
- 酵母转化验证方法
已经有15人回复
- 酵母表达 转化子PCR验证
已经有9人回复
- 酵母基因敲除回补实验
已经有9人回复
- 酿酒酵母基因敲除敲除盒的构建
已经有7人回复
- 以酵母基因组为模板进行PCR扩增没有条带
已经有6人回复
- 怎么验证我转化成功呀
已经有16人回复
- 酿酒酵母基因敲除实验顺利需多少时间
已经有22人回复
- 酵母菌落PCR的方法
已经有15人回复
- 目的基因导入到受体细胞会发生基因重组吗？说说原因！
已经有6人回复
- 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？
已经有17人回复
- 【求助/交流】基因功能验证
已经有8人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母URA3基因敲除的问题
已经有30人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转后PCR验证问题
已经有20人回复
- 【求助/交流】关于基因敲除
已经有21人回复
- 【求助/交流】关于酵母菌落PCR
已经有8人回复
- 【求助/交流】为什么质粒转化后晒出的菌在原培养基上长不出
已经有5人回复
10楼2014-02-26 22:23:49
2楼2014-01-07 23:17:40
3楼2014-01-08 09:52:09
4楼2014-01-10 19:57:57
