应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎么验证我转化成功呀
171/2返回列表12下一页
查看: 2272  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huichong

铁虫 (初入文坛)

[交流] 怎么验证我转化成功呀 已有15人参与

我的质粒连接后就做了转化到DH5a里，然后涂在lb+氨苄的板子上也长了菌，但是我做菌液pcr验证的时候一直p不出来。没有条带，引物特别亮，究竟我这是不是没有转化成功呀，按道理不是长菌了就是成功了吗。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-11 13:38:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-11 20:32:54
本帖内容被屏蔽
3楼2012-06-11 15:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

黑手1989

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
长出来不代表转化进去了重组质粒，转进去空质粒的菌也是可以长出来的吧
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-11 14:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangly

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-06-11 20:32:58
你应该涂个空白对照，看看感受态有没有被污染或者平板的抗生素有没有失效。如果前两者没有问题，再做菌液PCR，还是你上述的结果的话，就是没有连接上，全是质粒自连了。
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-11 15:51:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flownaway

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
连接的产物应该留一部分做酶切电泳验证的
赞一下 回复此楼
5楼2012-06-11 16:12:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ivyvampire

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第一，连接后长的菌可能是空载的，第二，PCR条件不一样，也可能P不出结果
我们一般都是提质粒酶切验证的
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-11 16:55:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

504775490

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR不一定准确，可以做个酶切，或者直接拿菌液去测序！
赞一下 回复此楼
7楼2012-06-11 21:38:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by flownaway at 2012-06-11 16:12:59
连接的产物应该留一部分做酶切电泳验证的

这个真没听说过有这么做的
赞一下 回复此楼
8楼2012-06-11 21:42:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jimjohntall

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
实在不行，你就提个质粒，测序，应该是可以确定的
赞一下 回复此楼
9楼2012-06-11 21:46:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilxly

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌落PCR不可靠 建议双酶切然后送测序
赞一下 回复此楼
10楼2012-06-11 23:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huichong 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 欢迎申博同学联系 +3 天道酬勤2026686 2026-03-10 7/350 2026-03-15 19:03 by 天道酬勤2026686
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 283求调剂 +6 小楼。 2026-03-12 9/450 2026-03-14 22:15 by cfxczx2015
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 288求调剂 +14 王晓阳- 2026-03-09 19/950 2026-03-14 02:05 by JourneyLucky
[考研] 332分材料工程调剂 +3 莓好时光海苔 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:03 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 7/350 2026-03-13 17:28 by xujiaoszu
[考研] 土木第一志愿276求调剂，科研和技能十分丰富，求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭