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怎么验证我转化成功呀
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huichong
铁虫
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专业: 生物大分子结构与功能
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怎么验证我转化成功呀
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我的质粒连接后就做了转化到DH5a里,然后涂在lb+氨苄的板子上也长了菌,但是我做菌液pcr验证的时候一直p不出来。没有条带,引物特别亮,究竟我这是不是没有转化成功呀,按道理不是长菌了就是成功了吗。
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1楼
2012-06-11 13:38:16
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flownaway
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专业: 生化分析及生物传感
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连接的产物应该留一部分做酶切电泳验证的
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5楼
2012-06-11 16:12:59
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黑手1989
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专业: 微生物遗传育种学
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长出来不代表转化进去了重组质粒,转进去空质粒的菌也是可以长出来的吧
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2楼
2012-06-11 14:01:35
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nemo88
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3楼
2012-06-11 15:32:37
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jiangly
木虫
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专业: 系统生物学
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2012-06-11 20:32:58
你应该涂个空白对照,看看感受态有没有被污染或者平板的抗生素有没有失效。如果前两者没有问题,再做菌液PCR,还是你上述的结果的话,就是没有连接上,全是质粒自连了。
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4楼
2012-06-11 15:51:45
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